苦楝内生真菌生物多样性及其代谢产物生物活性研究.pdf

安徽农业大学
硕士学位论文
苦楝内生真菌生物多样性及其代谢产物生物活性的研究
姓名:单淑芳
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:樊美珍;黄勃
20090601
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摘要分子生物学鉴定,经测序发现:朐贕中登录的蝞本研究以在安徽、江苏、陕西的部分地区采集的苦楝为研究对象,通过对苦楝内生真菌的分离、纯化、培养、鉴定以及活性代谢产物的提取工艺等方面的研究,对资源的综合利用进行探索研究。从安徽农大校园、安徽灵璧、江苏无锡、陕西咸阳的苦楝的根、枝、叶、叶柄、花和果实进行了初步研究分离培养,共获得昴谏婢掷氪炕⑿翁鄄臁且发现同一植株的不同生长部位以及不同季节内生真菌的类群不同,其中交链孢属占总数的.%,为分离率高、数量大的优势类群。%,故可判断该菌株为节菱孢属真菌。朐贕中登录的似率为ィ士膳卸细镁晡7郯羰哒婢对株有代表性的苦楝内生真菌的代谢物的生物活性拮抗筛选研究发现,有株甇%嚅谏婢谄桨遛卓顾缴希辽俣云渲幸恢种参锊≡婢硐殖不同程度的抗性,它们有可能发展成为对这些植物病害进行生物防治的良好的微生物资源。菌株禾宸⒔筒锞哂薪细叩目咕钚裕杂衩仔“卟⒚藁ǹ菸小麦赤霉病、苹果炭疽病四种指示菌的菌丝生长抑制作用明显优于其它菌株,抑菌圈直径也大于其它菌株。稳定性测试的结果显示:旯馕榷ㄐ院椭匚榷ㄐ越确定了活性物质的最佳的提取工艺为:℃条件下浓缩发酵液至原体积的,加短寤ヒ掖乙醇终浓度为%汲粒仓霉梗下离一去除沉淀并脱醇浓缩至一定体积后,以乙酸乙酯为萃取剂,按的体积比分两次萃取,合并脂溶相,浓缩至原脂溶相体积的吹弥羣活性代谢产物对株生长良好的具有代表性的菌株做致病性测试,结果发现、、蚄相对于其他株菌株对马尾松毛虫有较强的致病性,其中致病性最强的~.%,在处理第时校正死亡率达%,经鉴定此菌株为球孢白僵菌。球孢白僵菌作为~种内生真菌,在显微鉴定,它们分属于敲拧目、啤簦允靖弥参锬谏婢亩嘌裕朐贕中登录的茎点霉属真菌。朐贕中登录的的好,而热稳定性和稳定性稍差。比较不同提取方法的提取处理及相关理化试验,的粗提品。国内还未见报道。
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效液相色谱一质谱复筛,最终从采自安徽灵璧苦楝树叶中分离获得一形付饲喂法匝椋株代谢生长旺盛的内生真菌发酵液的浓缩液进行了生物活性测定,结果发现的校正死亡率分别达到.%和.%,与其他内生真菌代谢产物的生物活性差异显著。把发酵液滴到马尾松毛虫的前胸和背板上后,对触杀结果进行统计分析发现,徊锒运擅ǔ娴拇ド弊饔们浚喽杂谄渌鞔聿钜煜著。其中和男U劳雎史直鸫镏罦ズィド被钚宰钋俊利用薄层层析曰竦玫株内生真菌发酵提取物进行初筛,再通过高株产苦楝素的菌株,且辏ㄊ粲诮涣存呤鬉关键词:苦楝,内生真菌,分子鉴定,抗菌活性,杀虫活性,苦楝素。对柳兰叶耳诖和和
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研究生签名:——萼虹霸拢。歹年厂月,呷年易月,多日攀饫关于论文使用授权的说明独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵第一导师签名:确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:
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南鬃凼植物内生真菌的研究进展自然界中,有许多着同人类生活密切相关的植物、动物与微生物,所有这些生物是都人类生活的保证,也是人类开发新型生物源物质的源泉。众所周知,微生物是我们地球上最为丰富,用于生物技术革命前言最有潜力的生物资源。虽然刈榧术能够构建生产人类所需目的产物的工程菌株,但是当今生物技术发展的起点仍然是我们寻找和开发有价值的生命现象,所以新的微生物来源就是寻找新微生物药物的有效途径【俊V参锾迥诨肪匙魑R恢痔厥獾纳常钤谄渲械亩嘀侄嘌奈⑸镒试已引起生物科学界研究人员的注意。内生菌可在寄主体内和纯培养中产生丰富多样的具有生物活性的次生代谢物,开发利用药用植物的内生菌的资源,研究植物与内生菌的相互关系具有重要的理论意义和实