紫外可见分光光度计的应用.pdf

紫外可见分光光度计的应用
紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。当前已成为全世界使用最多、覆盖应
用面最广的分析仪器。它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、
冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各
个方面,用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动
力学研究等。因为仪器涉及到光学、电学和结构等,所以它需要在一定的环境中应用
(1)定量分析
根据琅伯-比尔定律,样品的浓度和吸光度是成正比关系的,浓度越大,吸收值越高,
所以分光光度计用的最多的还是定量分析,定量分析的种类有很多,这里介绍常用的几种定
量分析方法:
A、绝对法:绝对法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用最多的一种方法。这是
一种以琅伯-比尔定律 A=εbC 为基础的分析方法,某一物质在一定波长下ε值是一个常数,
石英比色皿的光程是已知的,也是一个常数。因此,可用紫外可见分光光度计在λmax 波长
处,测定样品溶液的吸光度值 A。然后,根据琅伯比尔定律求出 C=A/εb,则可求出该样品
溶液的含量或浓度。
B、标准法:在选定的波长处,在相同的测试条件下,分别测试标准样品溶液 C 标和被
测试样品溶液 C 样的吸光度 A 标和 A 样。然后,按下式求得样品溶液的浓度或含量。
C 样=A 样/A 标×C 标
C、标准曲线法
紫外可见分光光度计最常用的定量分析方法是标准曲线法。即先用标准物质配制一定浓
度的溶液,再将该溶液配制成一系列的标准溶液。在一定波长下,测试每个标准溶液的吸光
度,以吸光度值为纵坐标,标准溶液对应得浓度