重型再生障碍性贫血骨髓造血免疫损伤机制及其相关抗原研究.pdf

天津医科大学
博士学位论文
重型再生障碍性贫血骨髓造血免疫损伤机制及其相关抗原的研
究
姓名:刘春燕
申请学位级别:博士
专业:临床医学;内科学血液病学
指导教师:邵宗鸿
2012-05
中又摘要,颊—в细胞功能因子表达水平、对骨髓造血细胞的损伤及其作用的致⒉】赡艿淖陨砜乖?7邢蛑瘟埔┪锾峁┮谰荨者、治疗后缓解的颊呒罢6哉照摺5谝徊糠盅芯啃в细胞损伤骨琇健5谌糠置魅稴患者靶向损伤的骨髓造血细庖叽胖榉盅』竦混合培养,蟛捎昧魇较赴跫觳馀嘌抵蠧、目的通过研究重型再生障碍性贫血靶细胞,证实в细胞与颊吖撬杷ソ咧涞摹耙蚬вΑ及“因果方式”,进一步阐明庖咚鹕斯撬柙煅5幕疲煌辈捎貌钜斓白质组学技术,对颊哂胝H怂柩魍蛔聪赴的蛋白质成份进行分析,筛选激活庖叻从赡艿目乖镏剩吹方法研究对象为天津医科大学总医院自年轮月初治髓造血细胞的途径,采用免疫磁珠分选例踔位颊呒】嫡H外周血瓺效应赴攵縍觳夥盅∠赴вσ蜃哟┛素、颗粒酶⒅琢龌邓酪蜃右表达情况。第二部分验证颊咝в细胞对骨髓造血细胞的损伤作用,以免疫磁珠阳性分选例踔位颊摺齋缓解患者及名正常健康人狣赴魑Pвο赴跣苑盅∪コ齋缓解患者、正常健康人骨髓单个核细胞中赴笞魑0邢赴玈初治患者效应细胞分别与航饣颊呒罢=】等税邢赴旌吓嘌分别为实验组⑹笛樽,同时设航饣颊咝в细胞与航饣颊吖撬璋邢赴旌吓嘌及正常健康人效应赴胝=】等税邢赴旌吓嘌樽魑6哉分别为对照组⒍哉兆后通过流式细胞术以膜联蛋白检测靶细胞凋亡状况,全自动生化分析仪检测培养体系上清液乳酸脱氢酶胞,分别将颊摺⒄、赴蛲鲎纯觯灰缘タ寺】固灞昙荢患者和正常人骨髓、细胞,比较其鞍椎谋泶锪俊5谒牟分探索导致庖呒せ畹目乖镏剩捎锰谂嘌ń玈患者、缓解患天津医科大学博士学位论文,狣
效应细胞与航獍邢赴旌吓嘌缓解组⒄H诵вο赴胝H者及正常人单核细胞,体外诱导、分化为成熟的魇较赴欠盅〉玫礁纯度崛∽艿鞍祝兴虻缬痉掷氲鞍字剩〔钜斓鞍字实憬斜榷裕明确颊適内与正常人不同的蛋白质成分,即为激活餝一系列自身免疫反应可能的抗原物质。、颗粒酶的表达量分别为.±、..6哉兆楸泶锪课..±,前者明显高于后者值分别为、籗初治组效应赴鸉的表达量为.±,明显高于正常对照组.±.;踔巫镃。в细胞的表达量为.±,亦明显高于正常对照组.±.。第二部分踔位颊咝вο赴隨缓解患者靶细胞混合培养组验组、踔位颊咝вο赴胝=】.±.ィ琒缓解患者靶细胞混合培养组W靶细胞凋亡比例分别为%、±.ィ笛樽閘、实验组⒒、实验组⒒航庾榫飨愿哂谡W;实验组实验组嘌逑瞪锨逡篖水平分别为./.±.疞,明显高于正常组的.±.%,明显高于对照组.±.%、.士ィ飨缘陀对照组ァ.%、.士.%,。踔患者效应细胞与正常健康人靶细胞笛樽、.%、..%、.土.%、.士.%
关键词:..%,其凋亡相关蛋白、、,核糖体连接蛋白、泛素化相关蛋白表达增高,与庖叻⒉』浦衜细胞激活相关。结论患者外周血瓺效应赴┛姿亍⒖帕C副泶锼均较正常人明显升高,提示穿孔素、颗粒酶可能在颊呦赴拘訲淋巴细胞,损伤骨髓造血过程起到了重要的作用;患者вο赴鸉泶镆嗝飨栽龈撸赡懿斡肓斯撬柙煅0细胞的凋亡损伤,同时高表达的也可能参与了辅助性赴侨旱牡鹘冢ǘ訡本身可能没有作用;此外,瓺也是参与损伤骨髓造血靶细胞的重要效应因子,。因此,上述三种途径可能均在庖叻⒉」讨蟹⒒恿酥匾作用。初治患者瓺效应赴芄幻飨栽黾踊航饣颊呒罢常人骨髓造血靶细胞凋亡率,提示瓺效应赴赟骨髓免疫损伤中机制中居于重要地位。,临床应用免疫抑制治疗中应注重足量、足疗程给药,以便彻底控制患者异常免疫状态,防止复发。初治患者效应赴芄挥盏颊H薈、细胞凋亡增加,对正常的骨髓造血干/祖、粒系、单核系细胞均具有杀伤作用;经检测颊吖撬鐲、、赴达乖⒖,故疐低辰榈嫉南赴蛲鲈赟免疫发病中发挥了重要作用;而颊赴鸉表达明显增加,可能是庖咚鹕说闹饕0邢赴患者械蛲鱿喙氐鞍住⒑颂翘辶蛹胺核鼗喙氐鞍妆泶镆常,可能与募せ钕喙亍样树突状细胞蛋白质组学抗原天津医科大学博士学位论文,
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