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基于星点设计法优化马齿苋多糖的提取工艺


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　　摘要：旨在用星点设计-响应面法优化马齿苋多糖的提取工艺。采用超声辅助提取法提取马齿苋多糖，以多糖提取率为评价指标，通过提物温度、提取时间、料液比、提取次数等单因素结合星点设计法-响应面试验进一步优化提取工艺条件。结果表明，最佳提取工艺为提取温度70 ℃、提取时间43 min、料液比1 g ∶23 mL、超声功率230 W，在该条件下，%，%。由结果可知，该方法模型的预测性良好，提取条件稳定，提取过程简便合理、可靠。
　　关键词：马齿苋;多糖;超声提取;响应面-星点设计;提取率
　　中图分类号： ： A
　　文章编号：1002-1302（2020）08-0207-06
　　收稿日期：2019-04-01
　　基金项目：吉林农业科技学院青年基金（编号：吉农院合字[2018]第3004号）。
　　作者简介：张 志（1981—），男，黑龙江哈尔滨人，硕士，讲师，主要从事药物有效成分提取及药物制剂研究。Tel：（0432）63509964;E-mail：******@。
　　马齿苋（Portulaca oleracea L.），别称马苋、五行草、长命菜等，属于一年生肉质类草本植物。《本草纲目》记载“其叶并比如马齿，而性滑利似苋，故名马齿苋”[1]。马齿苋是被世界卫生组织提名的最有用处的药用植物之一，也是药食同源的野生植物之一[2]。目前，市场上研发的主要是马齿苋食用产品，如功能饮料，此外还有含有马齿苋的化妆品等，而作为药品使用的马齿苋的利用率较低。马齿苋的活性成分主要有多糖、黄酮、有机酸、生物碱等，目前对于马齿苋多糖的研究主要集中在药理活性方面，对马齿苋多糖的相关研究显示，其药理活性主要是降低血糖数值，也可以降低血脂，同时具有抗氧化、抗病毒等功效，具备很好的药用功能[3-6]。近年来，关于马齿苋多糖提取工艺的研究也陆续有不少报道，大多数采用传统的水提醇沉的提取方法，但是由于水的极性大，容易将马齿苋中溶于水的其他成分一起浸提出来，给后续的分离纯化增加了难度[7]。因此，本试验采用星点响应面法优化马齿苋多糖的超声提取工艺，以期实现马齿苋多糖提取的新突破，从而为后续马齿苋多糖的药用价值开发奠定一定的物质基础。
　　1 材料与方法
　　 试验材料
　　具有根、茎、叶的新鲜马齿苋全株采摘于花期前，采摘地点为吉林省吉林地区，经吉林农业科技学院鉴定确认。
　　 试验试剂
　　D-葡萄糖（分析纯），天津市恒兴化学试剂制造有限公司;苯酚（分析纯），天津基准化学试剂有限公司;石油醚、丙酮、乙醚（分析纯），天津市致远化学制剂有限公司。
　　 仪器与设备
　　KQ-50DA型数控超声波提取机，昆山市超声仪器有限公司;725N紫外-可见分光光度计，上海精科仪器有限公司;R1001-VN旋转蒸发仪，郑州长城科工贸有限公司;AUY220电子分析天平，日本岛津公司。
　　 试验方法
　　 马齿苋多糖的超声提取及含量检测[8] （1）标准曲线的制备。采用苯酚-硫酸法，精确称取1 g于105 ℃干燥至恒质量的葡萄糖标准品，以蒸馏水为溶剂，溶解定容于100 mL容量瓶中，摇匀后从中量取1 mL溶液，定容于100 mL容量瓶中并摇匀，即得 mg/mL 葡萄糖标准溶液。、、、、 mL置于5个10 mL容量瓶中， mL 6%苯酚試剂摇匀，之后迅速加入5 mL浓硫酸溶液，将试管放入沸水中显色15 min，冷却至室温定容。以水为空白，用紫外-可见分光光度计于490 nm波长处测吸光度，得到葡萄糖标准曲线回归方程。
　　（2）马齿苋的前期处理。将新鲜马齿苋全株用自来水冲洗以去除表面杂质，将冲洗后的马齿苋在阴凉干燥处晾至无水分，放入55 ℃干燥箱中烘干。将干燥后的马齿苋用粉碎机粉碎，过40目筛后于密封袋中保存。称取适量马齿苋干品置于索氏提取器中，用5倍石油醚连续回流脱脂2次，再用5倍95%乙醇回流提取2次，以除去马齿苋干品中的单糖、低聚糖、苷类等杂质，将滤渣于通风处晾干。经上述处理后，将所得马齿苋粉末于65 ℃恒温干燥箱中干燥至恒质量，用于多糖的提取。
　　（3）马齿苋多糖的超声提取。称取一定量经上述