芽孢菌菌种鉴定部分实验
1、好氧性-半固体琼脂穿刺
-%,
一般培养用培养基
伯杰氏手册
2、V-P实验(测定培养物终pH)
(科大微生物)按培养液一半的量加入6%萘酚酒精液,摇匀,再按培养液1/3量加入40%氢氧化钾溶液,充分摇匀。呈现红色者为V-P阳性,不呈现红色为阴性,后者放培养条件下继续培养4h再观察判定。
3、柠檬酸盐
4、D-木糖、D-甘露醇
5、葡萄糖产酸产气
糖发酵培养基(科大微生物实验):
牛肉膏 %
蛋白胨 1%
氯化钠 %
%
%%(体积分数)
蒸馏水配制,
方法:葡萄糖发酵管按上述成分配好后,%葡萄糖,分装于有一个倒置杜氏管的试管内,121℃灭菌15min。其他糖分别配成10%溶液,无菌吸管吸取0,5mL加入10mL培养基内。蔗糖不纯,加热时会自行分解,采用过滤除菌法。乳糖发酵无牛肉膏。
紫色培养基变黄者,利用葡萄糖产酸;培养基变黄,杜氏管中又有气泡,产酸产气,气泡似小米粒,产酸微量产气
6、酪素水解及酪氨酸水解
酪素水解试验(酪蛋白水解) 牛奶平板的制备:取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中(或用50mL脱脂牛奶),,将两液分开灭菌。待冷至45-50℃
时,将两液混匀倒平板,即成牛奶平板。将平板倒置过夜,使表面水分干燥,然后将菌种点接在平板上,每皿可点接3-5株菌。适温培养1、3、5天,记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。
配制该培养基时,切勿将牛奶和琼脂混合灭菌,以防牛奶凝固。
酪氨酸水解 ,115℃,20分钟灭菌,然
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