NK13菌Bacillus+megaterium中拆分酮基布洛芬同工酶研究.pdf

聊缈纪锪中拆分酮基布。靠盐夫淫硕士学位论文洛芬同工酶的研究南开大学研究生院二。一一年五月室斐斐亟±生塑丝堂皇筮王生物堂答辩委员会主席一齄匾塞熬援韭金红塾握生金型堂堂瞳酶堂皇醒王猩评阅人墓室童壑童壹塾援论文作者申请学位学科专业指导教师培养单位研究方向中图分类号:学校代码:密级:公开.
南开大学学位论文使用授权书学历硕十固硕士专业学位口史斐斐年南开大学研究生学位论文作者信息业锘в敕肿由镅根据《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》,我校的博士、硕士学位获得者均须向南开大学提交本人的学位论文纸质本及相应电子版。本人完全了解南开大学有关研究生学位论文收藏和利用的管理规定。南开大学拥有在《著作权法》规定范围内的学位论文使用权,即:换竦谜弑匦氚垂娑ㄌ峤谎宦畚ㄖ街视∷⒈炯暗缱影,学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存研究生学位论文,并编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》:=萄Ш涂蒲心康模?梢越公开的学位论文作为资料在图书馆等场所提供校内师生阅读,在校园网上提供论文目录检索、文摘以及论文全文浏览、下载等免费信息服务;萁逃坑泄毓娑ǎ峡4笱教育部指定单位提交公开的学位论文;宦畚淖髡呤谌ㄑO蛑泄萍夹畔⒀芯克中国学术期刊馀电子出版社提交规定范围的学位论文及其电子版并收入相应学位论文数据库,通过其相关网站对外进行信息服务。同时本人保留在其他媒体发表论文的权利。非公开学位论文,保密期限内不向外提交和提供服务,解密后提交和服务同公开论文。论文电子版提交至校图书馆网站:://..。本人承诺:本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品,并已通过论文答辩:提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致,如因不同造成不良后果由本人自负。本人同意遵守上述规定。本授权书签署一式两份,由研究生院和图书馆留存。作者暨授权人签字:论文题目菌胁鸱滞;悸宸彝∶傅难芯Ш臝鸨缛掌贘论文类别博高校教师口同等学力硕士口院/系/所生命科学学院联系电话..甤通信地址时:天津市南开区卫津路号南开大学分子生物学研究所邮编:欠衽嘉7枪ǹB畚膌否注:本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写皇搅椒签字后交校图书馆,非公开学位论文须附《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》。姓名备注:
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,%;菌转酮基布洛芬属于蓟崂嘁┪铮且恢种匾5姆晴尢蹇寡滓菩в于同类布洛芬。临床上广泛使用的酮基布洛芬是由化学方法合成的外消旋体,因此患者使用的该药只有一半具有药效。利用微生物中酯酶/月旨肪酶立体选择性拆分获得具有光学活性的单一对映体具有重要的应用价值。过去的研究发现,从自然界筛选出的手性底物高转化活性的野生菌,存在产物光学纯度不高的问题。本文以实验室筛选出的转化率高且具有一定不对称转化外消旋酮基布洛芬氯乙酯能力的菌株和携带来自该菌株的三种酯酶同工酶基因的工程菌为材料疚慕üこ叹猅、,其质粒所含外源基因锹己欧直鹞狣,对同工酶转化酮基布洛芬进行了系统地研究。首先,鉴定了已构建的工程菌捅泶锏脑虿皇目的基因的丢失造成的,通过重组质粒重新转化,使工程菌获得了高表达。然后,以乙酸对硝基苯酯为底物,测定温度对滞っ富钚缘挠跋臁=果显示三种酶的催化最适温度不同,酯酶、淖钍饰露确直鹗妗建立了重复性好、便于操作的;逑担靡蕴教秩止こ叹牟煌组合在此体系中转化外消旋酮基布洛芬氯乙酯,通过薄层层析和高压液相检测转化效果。结果发现,三种工程菌分别转化时,虽然工程菌;盍狭砹街止こ菌低,但是产物;悸宸夜靠纱ィこ叹鶷和牟锕值分别是;,仍发现脂肪酶系偷淖;钚浴6ッ窽和钚愿撸合转化时共同作用造成;;的结果与出发菌有极为相似的趋势,%,℃和℃。
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