生物实验报告叶绿体中色素的提取和分离.doc

实验八 叶绿体中色素的提取和分离
教学目的
1． 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2． 探索叶绿体中有几种色素。
实验原理
1． 叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙
酮可提取叶绿体中色素。
2． 色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶
解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
实验程序
1）称取5g绿色叶片并剪碎 提取色素
2）加入少量sio2、caco3和5ml丙酮 收集到试管内并塞紧管口
1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时
到达滤液细线）
制滤纸条
2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线
1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线
滤液划线
2）干燥后重复划2-3次
1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）
纸上层析（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中
3）用培养皿盖盖上烧杯
观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）
最宽：叶绿素a；
最窄：叶绿素b；
相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；
相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。
实验关键
1． 选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2． 画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙 再进
行，重复2-3次。
3． 层析时不要让滤液细线触及层析液。
注意事项
1． 因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用
棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。
2． 在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙
的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。
3． 分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层
析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
【同类题库】
．下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液？（c）
a．丙酮溶液b．酒精溶液c．水溶液 d．汽油
．在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是（d）
a．叶绿素ab．叶绿素b c．叶黄素 d．胡萝卜素
．将菠菜叶表皮细胞和人的口腔上皮细胞制成装片，从盖玻片一侧滴入30%的蔗糖溶液，另一侧用吸水纸重复吸收几次，分别放在显微镜下观察，其结果是（d）
a．前者发质壁分离，后者也发生质壁分离b．前者发生质壁分离，后者破裂
c．前者发质壁分离，后者质壁分离复原 d．前者发生质壁分离，后者皱缩
．如果没有丙酮和菠菜叶，要保证分离后色素带清晰，可以用来替代的最佳实验材料是（a）
a．酒精和麦苗 b．酒精和大白菜 c．蒸馏水和大白菜d．蒸馏水和麦苗 ．用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验”，下列不能用作提取剂的是（a）
a．水 b．丙酮 c．酒精 d．ccl4
．为了提取绿色植物叶绿体中的色素，在研磨绿叶时加入少许碳酸钙，其作用是（b）