2021年布鲁氏菌试管凝集试验.ppt

免疫学基础
布鲁氏菌试管凝集试验
2020/12/5
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由于布鲁氏菌培养的营养条件苛刻而且时间长，所以布鲁氏菌的血清学诊断越来越受到重视。
布鲁氏菌试管凝集试验
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主要是根据相应抗原抗体可以在体外发生特异性结合并呈现可见反应的原理,用已知抗原(或抗体)检测体液中未知的抗体(或抗原).由于试验时通常是用患者血清作为待检材料,所以检测抗原抗体的体外试验又称为血清学试验或血清学反应.
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血清学检查既可协助早期诊断，还可确定是否复发或重复感染。
感染1-2周后，患者血清中出现IgM抗体，可以用凝集试验或抗人球蛋白试验检测．
感染３周后，患者血清中出现IgG抗体，可以用补体结合试验，荧光抗体或ELISA检测．
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虎红平板的凝集反应（RBPT）
布鲁氏菌试管凝集试验
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原理
该试验又称为班氏孟加拉红平板凝集试验。由于所用的抗原是酸性（—）带色的抗原，该抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性、检查出的抗体是IgG类，因此提高了该项反应的特异性。
布鲁氏菌试管凝集试验
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器材与试剂
虎红平板凝集抗原、被检血清、清洁脱脂玻片或有凹形孔的玻片、、混合棒或牙签
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试验方法
，，充分混匀，在5分钟内观察结果。
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(四) 结果判定
有二种方法，第一种是，出现可见的凝集反应就判为阳性；
另一种用“+”表示凝集程度按下列标准用加号记录反应强度：
++++：出现大的凝聚片或小的粒状物，液体完全透明，100%凝集
+++：有明显的凝聚片，液体几乎完全透明，75%凝集
++：有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集
+：液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集
-：液体均匀混浊
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评价
此法简便、快速、容易操作，适于基层大面积检疫；
此法有一定敏感性，检查牛的阳性率稍高于绵羊、山羊。
因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合试验、二巯基乙醇（2-ME）试验和抗球蛋白（Coomb’s0）试验有较高的吻合率。
该法受制备抗原时条件影响较大，所以每批制备抗原应予以检查、标化方可应用。
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