核医学 分子核医学.ppt

定义:分子生物学与实验核医学结合
内涵:利用示踪技术观察体内的生化过程
并与相关基因联系起来的一门分支学科
是其重要理论基础。
研究领域:受体显像
基因显像
重组单抗片段、肽类放射性药物
及微型抗体。
特点:
1)深入分子水平认识疾病,通过细胞信息
传导、基因表达、生化代谢等多个方面
在解剖学和功能症状出现之前发现病变信
2)通过特定示踪剂,将疾病与基因表达的
改变联系起来,提高疾病诊治的层次。
3)当代分子生物学研究成果是其理论源泉。
4)分子识别是分子核医学的理论基石。
5)生化代谢的评价是其理论重要组成部分。
当前的几个热门研究领域(六个领域)
1、受体显像:举例a、b、C
2、受体介导的放射配体治疗
3、放免显像(RI1)
4、放免治疗(RIT)
5、基因显像和基因放射治疗
原理:将放素标记的反义寡核苷酸注入受
试者体内,由于体内癌基因等有过度表达,通
过体内核酸分子杂交而与相应靶基因结合,以
定位、定量显示特异靶基因,从而进行基因诊
断以及破坏相应致病基因而达到治疗的目的。
反义寡核苷酸基因显像剂的特点:
1)分子量小
4)无免疫原性
2)穿透力强
5)与靶结合快
3)特异性高
6)靶啡靶比值高
反义寡核酸的基本要求:P303
基因显像必备条件:
1)胞浆中必须有足够的mRNA基因产物
标记反义探针必须与靶细胞特异选择性结合并保持稳定。
6、代谢显像:主要指PET
显像原理:阝+衰变的放素与体内靶物质作
用而损失能量被吸收、转化为二个方向相
反的高能r光子。它提供了很好的空间定位
信息,经计算机处理重新购成清晰的三维
图像。
发射正电子的主要核素
1C13N15018F
半衰期(分)

阝核素特点:
1)大部分为人体基本元素,全部为人工生产
2)湮灭辐射可获得三维图像
3)T1/2短,一次可给较大剂量,图像清晰
4重复给药,动态观察。
临床应用举例:
18F-萄糖研究脑功能状况,老年瘋呆时摄取
萄↓,测脑部放射性下降
脑瘤区1F萄↑。
(一)核酸标记:标记上放射性核素的又叫探针,
或叫基因探针。
探针分类:基因组DNA探针
CDNA探针以mRNA为模板
CRNA探针反向合成的DNA片段
人工合成寡核
探针的标记物分类
放素:32P3P3H14C125等
非放:生物素、地高辛等
两类探针的比较
放素探针
非放探针
灵敏度高、应用广灵敏度低,对核酸分
对人体有害、寿命子有修饰作用,但无
短
放射危害,寿命长
六种常用的放素的性质、特点P273表
11-1
2、核酸探针的具体标记方法:
体内标记:将3P磷酸盐加到细胞或细菌培养
体系中,使3P参入新合成的核酸分子上。
酶促法体外标记:很常用,先将核素预先标记
在核苷酸上,然后利用多种核酸聚合酶将核苷酸
参入到探针分子中或交换到探针分子中去。
常见的几种外标记方法:
1)DNA缺口平移法:已有试剂盒提供如
Amash ema, promega,BR等公司。
2)随机引物法:也有试剂盒上市。
两种方法注意点:
①模板越小,产物的比活度越高;
②产物的长度与加入寡核苷酸引物的量成正比
③有5种原因常引起标记碍障
a、DNA双链未充分变性
b、DNA纯度不佳;
c、 Klenow酶效价不够;
d、DNA片段太少,G5分离时丢失;
e、DNA用量过大或过少