Error-pronePCR致哈茨木霉几丁质酶突变的条件优化.pdf

第44卷第10期 2013年10月东北农业大学学报 JoumatofNortheastAgriculturalUniversity 44(10):134-138 网络出版时间2013—10—2315:09:56 [URL]s/detail/ Error—pronePCR致哈茨木霉几丁质酶突变的条件优化王傲雪L,李微,陈秀玲,李景富(,哈尔滨 l5O030:,哈尔滨 150030) 摘要:运用Error—pronePCR对哈茨木霉几丁质酶基因(Chit42)进行人工突变。在常规PCR基础上,通过提高体系中Mg浓度,适当加入一定浓度Mn“,调节四种dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dGTP)浓度,得到产生明显突变效果的试验条件。在Error—pronePCR中,·LMg2,]·LMn“,·L。dATP和 dGTP,,随机挑选10个克隆测序,累积13370个碱基,检测到57个突变, %。为产生优良突变株、酶分子定向进化奠定基础。关键词:Error—pronePCR;哈茨木霉几丁质酶;Chit42;突变中图分类号:Q815 文献标志码:A 文章编号:1005—9369(2013)10—0134—05 王傲雪,李微,陈秀玲,-pronePCR致哈茨木霉几丁质酶突变的条件优化【J】.东北农业大学学报,2013,44(10):134—138. WangAoxue,LiWei,ChenXiuling, usingError-pronePCR[J].JournalofNo~heastAgriculturalUniversity,2013,44(10):134-138.(inChinesewithEnglishab- stract) OptimizationofthemutationconditionsofTrichodermaharzianum chitinasegeneusingError-pronePCR/wANGAoxue’一,LIWei’,CHENXiuling’,LI Jingfu’(,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China; ofLifeSciences,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China) Abstract:Inthisstudy,theTrichodermaharzianumchitinasegene(Chit42)wasmutatedbyusing -pronePCR wereinvestigatedbyimpr