RICU多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因特征研究.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
RICU多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因特征研究
姓名:范明鑫
申请学位级别:硕士
专业:内科学
指导教师:阎锡新
20090301
多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因特征研究目的:观察我院刚临床分离多重耐药铜绿假单胞菌菌..。多基因聚类分析发现存在克摘要株耐药性与遗传学特征。了解耐药基因分布特点、菌株同源性及传播情况。方法:收集分离铜绿假单胞菌菌株药敏试验采用瓸法测定挚咕┪锏拿舾行裕∪《嘀啬鸵┚株共株,,外膜通道蛋白基因献幽拖炯粱騫共种基因。应用多基因聚类分析法分析菌株亲缘性。结果:株多重耐药铜绿假单胞菌菌株中、.、.均未检出,阳性.’阳性%“阳性.,阳性.,阳性.,笔.,整合子耐消毒剂基因隆传播现象。结论:。耐消毒剂基因携带率高,并发现存在克隆传播现象,应引起临床重视。析;关键词:多重耐药;铜绿假单胞菌;耐药基因;聚类分中文摘要
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~虢张一:、诬⋯裤圈酬研究生躲%硌新妊护弓年∥月学位论文使用授权及知识产权归属承诺河北医科大学研究生学位论文独创性声明科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。责任。.
多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因特征研究多重耐药菌的迅速出现和广泛传播是近年来细菌耐药性发展的显著特点。呼吸监护室的特殊医疗环境、治疗措施及收治对象,使其成为各种耐药菌感染的多发和频发区。铜绿假单胞菌作为高分离率高致死率的病原体,其多重耐药菌株的出现,使临床治疗陷入困境。为了解我院呼吸重症监护病房分离多重耐药铜绿假单胞菌耐药性与遗传学特征,我们对株多重耐药铜绿假单胞菌菌株进行了常见荒邗胺酶基因,外通道蛋白及整合子遗传标记检测,并以各分子标记作聚类分析了解菌株亲缘性。报告如下:材料与方法昀丛春途旨甓嘀啬鸵┩碳俚グ昃离自年轮月间河北医科大学第二医院机械通气患者下呼吸道。全部菌株均使用生物梅里埃公司妇ㄒ羌ň帧1曜季晡4蟪ΠO屯碳俚グ鶤。┟羰匝椴捎肒.ú舛种抗菌药物的敏感性。并根据美国璑臧嬉G蠼锌咕┪锩舾行判断。耐药菌株选取标准为耐亚胺培南蛎缆夼嗄,头孢他啶蛲锋哌咄#姘吞,哌拉西林/他唑巴坦,环丙沙研究论文刖菁希狫
甈扩增模板制备采用蛋白酶ǎ妇硖舸颗基因阳性,用凝胶成像系统观察并照相。基因检测数据收集起来组成原始数据矩阵,进行样本聚类分星,米诺环素,阿米卡星中不少于唷I秆【昕咕┪敏感性试验结果见。养菌落置入离心管内谠ぶ/蛋白酶芤,℃水浴,降至室温,改℃水浴,离心痬。上清液即为基因检测的模板液,取出模板液置于.℃冰箱保存备用。蚣觳庥τ肞法,各种靶基因┰鎏逑稻#好反应体系、引物各,总反应体积渲心0逡扩增产物热循环参数均为:℃预变性,然后℃℃℃环周期,最后一个℃延长至扩增产物热循环参数均为:℃预变性,然后℃℃,循环周期,最后一个℃延长至。各靶基因镄蛄屑鸗峁卸先嚼┰霾镉山缓冲液混匀,点样于%琼脂糖凝胶,在缪沟缬,出现目的条带即为检测嗷蚓劾喾治以各基因为分子标记作检测结果的聚类分析。每一耐药基因的觳饨峁直鹩代表条带匾性耐药基因扩增的片段嬖冢挥代表条带匾煨阅鸵┗扩增的片段淮嬖凇=甓嘀啬鸵┩碳俚グ帜鸵析,从而获得多个耐药基因喔龇肿颖曛菌株问亲缘性分析结果。
邗0访富甓嘀啬鸵┩碳俚グ衎均未检出,阳性.,阳性%琤粜株性%.琤粜株%缬窘峁畂罢献右糯ū昙甓嘀啬鸵┩碳俚グ笔.,阳性.。电泳结果见。嗷蚓劾喾治以各基因检测结果为分子标记的聚类分析发现了乜寺〈úィ淮匚株均携带有、,.基因:另一簇为昃恍衠基因。聚类分析树形图结果见。研究论文术%琤蟹.、.多士拿日
附表研究论文
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