桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的物质基础及作用机理的研究.pdf

南京中医药大学
博士学位论文
桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的物质基础及作用机理研究
姓名:王振中
申请学位级别:博士
专业:中药学
指导教师:段金廒
20090601
摘要桂枝茯苓胶囊由桂枝、茯苓、桃仁、白芍、牡丹皮组成,处方源于张仲景《金匮要略》桂枝茯苓丸,为治疗妇科血瘀证的经典名方。具有活血化瘀、缓消症块、去瘀生新、理气止痛之功效,临床用于治疗子宫肌瘤、慢性盆腔炎、痛经、卵巢本研究试图通过化学分离结合效应评价的方式,采用从整体动物到细胞及分子的多种模型,从不同角度阐释桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的物质基础及作用位、正丁醇萃取部位、水提部位;大孔树脂水洗脱部位、%乙醇洗脱部位、本研究通过小鼠离体子宫收缩模型,对桂枝茯苓胶囊各部位样品进行了活性位,%乙醇洗脱部位均表现出抑制活性。囊肿等妇科疾病,疗效确切,但其物质基础及作用机制研究相对较少。机制。一、桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的物质基础研究鹬:蜍呓耗姨崛∮敫鞑课坏姆掷本研究对胶囊内容物进行提取,不同极性溶剂萃取分离及大孔树脂吸附梯度洗脱两种分离方案,将全方分为挥发油部位、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部%乙醇洗脱部位、%乙醇沈脱部位、%乙醇洗脱部位,并针对各部位成分的特点建立了相应的指纹图谱。鹬:蜍呓耗也煌掷氩课换钚云兰评价。结果显示:挥发油部位,乙酸乙酯萃取部位,大孔树脂%乙醇洗脱部卵巢颗粒细胞增殖模型结果显示:正丁醇部位及大孔树脂%乙醇洗脱部位均具有显著的促进大鼠卵巢颗粒细胞增殖的作用。巨噬细胞释放模型结果显示:挥发油及大孔树脂%乙醇洗脱部位能明显抑制腹腔巨噬细胞分泌。鹬:蜍呓耗一钚圆课坏某煞址治效应评价研究结果表明,桂枝茯苓胶囊挥发性部位,大孔树脂%乙醇洗脱部位、%乙醇洗脱部位均存在效应物质,因此对这些有效部位进行了进一步化学成分分析鉴定。.分析结果表明:挥发油部位主要成分为桂皮醛,肉桂酸,丹皮酚。
.分析大孔树脂%乙醇洗脱部位、%乙醇洗脱部位结果表明:其主要成分为没食子酸、,,迕皇匙吁F咸烟牵嘈尤受眨忠┸眨芍药内酯苷,芍药新苷等。根据上述研究结果,对已鉴定的化合物进行了活性验证。证实桂皮醛、芍药苷等具有抑罄胩遄庸⑿酝淳P褪账醯幕钚裕幻皇匙铀帷⑸忠┸铡⑷桂酸、桂皮醛、苦杏仁苷、苯甲酸能明显抑制卵巢颗粒细胞增殖,,,:丹皮酚、芍药苷、芍药新苷、苦杏仁苷、苯甲酸能明显抑制大鼠腹腔巨噬细胞过度分泌。鹌と┮种菩∈罄胩遄庸淳P褪账醯幕蒲芯本研究通过考察桂皮醛对各种子宫平滑肌激动剂及盏嫉淖庸交的影响,初步确定了其作用机制是通过抑制细胞夕内流及细胞内库的释放,而对于去极化引起的细胞;诹魑廾飨杂跋欤煌庇τ糜ü饷副暌强疾了桂皮醛对平滑肌氧化应激产生的痉挛的影响,结果显示桂皮醛能部分拮抗并抑发现桂皮醛、芍药苷具有明显抑制凝血酶诱导的平滑肌增生作用。本研究建立了子宫平滑肌的氧化损伤及低温损伤模型,考察桂皮醛、芍药苷вΣ课恢懈鞒煞值幕钚匝橹二、桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的机制研究制细胞内浓度提高。鹌と⑸忠┸斩阅C赣盏甲庸交∠赴錾挠跋本研究通过考察桂皮醛、芍药苷对凝血酶诱导子宫平滑肌细胞增生的影响,鹌と⑸忠┸斩宰庸交∷鹕说谋;ぷ饔对损伤平滑肌增殖的影响。结果发现桂皮醛、芍药苷能显著促进平滑肌增殖并减少活性氧诱导的平滑肌细胞凋亡。行Р课恢胁煌煞峙湮槎曰钚缘挠跋本研究以桂皮醛、芍药苷为主要成分,考察它们与其他成分配伍后对活性影响。结果显示:芍药苷能提高桂皮醛抑制小鼠离体子宫收缩效应,苯甲酰芍药苷能明显提高芍药苷抑制小鼠离体子宫收缩效应,显示具协同作用。三、桂枝茯苓胶囊效应成分的药代动力学研究根据以上研究结果及已有实验基础,选择建立了苦杏仁苷、芍药内酯苷、芍
关键词:桂枝茯苓胶囊;原发性痛经;生物效应;物质基础;作用机制;药苷的./测定方法,并对其在比格犬体内的药物代谢特征进行了研究。结果显示,三者在体内的代谢均可用开放二室模型来描述,不同给药剂量下苦杏仁苷在比格犬体内的平均半衰期分别为忠┠邗ボ盏钠骄苦杏仁苷在体内消除较快,平均滞留时间较短,芍药内酯苷与芍药苷消除速率中药代动力学半衰期分别为忠┸。.在盘
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