1细胞凋亡及其实验室检测细胞凋亡及其实验室检测 cell apoptosis laboratory test cell apoptosis laboratory test 检验系郭旭霞 2017-1-24 2 ?死亡是生命的普遍现象,但细胞死亡并非与机体死亡同步。正常的组织中,经常发生“正常”的细胞死亡,它是维持组织机能和形态所必需的。细胞死亡的方式通常有 2 种: –①细胞坏死( necrosis ) –②程序性细胞死亡( programmed cell death , PCD )。 2017-1-24 3 2002 2002 年年10 10月月7 7日英国人悉尼日英国人悉尼· ·布雷诺尔、美国人布雷诺尔、美国人罗伯特罗伯特· ·霍维茨和英国人约翰霍维茨和英国人约翰· ·苏尔斯顿,因在苏尔斯顿,因在器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究究,获诺贝尔生理与医学奖。,获诺贝尔生理与医学奖。 2017-1-24 4 ?细胞坏死与细胞凋亡?细胞凋亡的调控?细胞凋亡常用的检测方法?细胞凋亡与疾病的关系 2017-1-24 5一、细胞坏死与细胞凋亡一、细胞坏死与细胞凋亡 cell necrosis and cell apoptosis cell necrosis and cell apoptosis ?(一)细胞坏死 cell necrosis : –是细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象。–坏死细胞的病理过程:酶性消化和蛋白变性。–参与此过程的酶,如来源于死亡细胞本身的溶酶体, 则称为细胞自溶( autolysis );若来源于浸润坏死组织内白细胞溶酶体,则为异溶( heterolysis )。 2017-1-24 6 ?细胞坏死的特征: –细胞坏死初期,胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解,核发生固缩或断裂。随着胞质内蛋白变性、凝固或碎裂,以及嗜碱性核蛋白的降解,细胞质呈现强嗜酸性,故坏死组织或细胞在苏木精/伊红染色切片中,胞质呈均一的深伊红色,原有的微细结构消失。–最后细胞膜和细胞器破裂,各种细胞器溶解,细胞结构完全消失, DNA 降解,细胞内容物流出,引起周围组织炎症反应。 2017-1-24 7 ?(二)细胞凋亡 cell apoptosis ?细胞凋亡是细胞死亡的一种形式,是调控机体发育、维护内环境稳定,由基因控制的细胞的自主有序的死亡形式。?细胞凋亡是借用古希腊语,表示细胞象秋天的树叶一样凋落的死亡方式。?在细胞凋亡一词出现之前,胚胎学家已观察到动物发育过程中存在着程序性细胞死亡( programmed cell death , PCD )现象,它是胚胎正常发育所必需的。?近年来 PCD 和细胞凋亡常被做为同义词使用,但两者实质上是有差异的。? PCD 是一个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中,某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的,并受到严格控制的正常组成部分,而凋亡是一个形态学概念,指细胞坏死受到基因控制的细胞死亡形式。 2017-1-24 8 ? : ?① PCD 在生物界普遍存在。?② PCD 是多细胞生物生命活动过程中不可缺少的组成内容,是其藉以存活的需要,贯穿于全部生命过程中,无论中低等还是高等生物都是如此。?③ PCD 是生物在进化过程中形成的细胞死亡形式。 2017-1-24 9 ? : –①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体; –②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症; –③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质,但是在坏死细胞中 ATP 和蛋白质合成受阻或终止; –④核酸内切酶活化,导致染色质 DNA 在核小体连接部位断裂,形成约 200bp 整数倍的核酸片段, 凝胶电泳图谱呈梯状条带; 2017-1-24 10
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