重组蛋白的分离纯化.pptx

基因表达体系
1.  原核体系
2. 真核体系
大肠杆菌 (Escherichia coli)
遗传背景清楚，基因工程操作方便，商品化表达载体种类齐全，表达效率高；
基本不分泌，易形成包含体(无正确折叠的立体结构)，无加糖等修饰
枯草杆菌 (Bacillus subtilis)
分泌蛋白质能力强，一般有天然立体结构；
无加糖修饰功能，培养液中蛋白酶活性高，重组蛋白易受蛋白酶的水解；
质粒不稳定，尚无商品化的表达载体
其 他
乳酸菌 (Lactic acid bacteria)
沙门氏菌(Salmonella typhimurium)
苏云金杆(Bacillus thuringiensis)
真核细胞表达体系
酵母细胞
昆虫细胞
哺乳动物细胞/组织
植物细胞/组织
酵母细胞
可生产分泌型蛋白；有天然立体结构，有加糖修饰功能；可进行染色体整合型基因表达;
糖链与哺乳动物加工的不一致，培养上清多糖浓度高;
商品化表达体系：
酿酒酵母（Saccharomyce cerevisiae）;
毕赤酵母 (Pichia pastoris);
裂殖酵母（Schizosaccharomyce pombe）
昆虫细胞
可以病毒感染的型式在成虫中生产，也可在体外培养细胞中生产蛋白;
适合分泌型和膜蛋白的表达，有加糖修饰；
糖链有所区别，表达量有限；
作为药物宿主细胞未被FDA认可
CHO细胞
可进行分泌表达，有天然立体结构，加糖方式与人体蛋白质完全一致；
表达量不够高，培养成本较高
动物乳腺组织
分泌生产有天然立体结构和活性的蛋白质至乳汁，产量高，分离纯化方便，特别适合药用蛋白的生产；
转基因动物制作花费巨大，实验周期长
鸟类输卵管组织
分泌生产有天然立体结构的蛋白质到蛋清，产量高，容易贮存和运输，分离纯化方便；
实验成本低，饲养费用低；
加糖方式可能与人有所不同