实验一:检测还原糖
实验材料:苹果、(做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。因为组织的颜色较浅,易于观察。)斐林试剂(包括甲液:/ mL NaOH溶液和乙液)
实验用具:解剖刀、研钵、试管、三角架、石棉网、烧杯、酒精灯、小量筒
操作方法
1. 制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤) 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3. 向试管内注入1mL 新制的斐林试剂,振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无 Cu ( OH ) 2生成。
4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀) 最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。也可 用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;缩短实验时间。
结论
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如:
葡萄糖+ Cu ( OH )2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O,
即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
实验二:检测脂肪
实验材料:花生子叶苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、体积分数为50%的酒精溶液
实验用具:解剖刀、载玻片、吸水纸、培养皿、毛笔、显微镜
方法
方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹III染液,观察样液被染色的情况。
方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况
具体操作
取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。
切片:用刀片在花生子叶的横断面上切下若干薄片,放入装有清水的培养皿
制片:从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取在载玻片中央,在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹III染液,染色3分钟(用苏丹IV染液,染色一分钟)用吸水纸吸去染液,再滴加1-2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色,用吸水纸吸去子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片。
观察:在低倍显微镜下找到子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清楚,换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见
结论
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时,酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中,将脂肪染成橘黄色。
实验二:检测蛋白质
实验材料:鸡蛋清、双缩脲试剂(包括A液:/ mL NaOH溶液和B液:/ mL CuSO4溶液)、蒸馏水 、试管。
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