喹诺酮类兽药残留酶联免疫检测方法研究与建立.pdf

江南大学
硕士学位论文
喹诺酮类兽药残留的酶联免疫检测方法的研究与建立
姓名:李雅丽
申请学位级别:硕士
专业:食品营养与卫生
指导教师:胥传来
20080601
摘要喹诺酮是一类合成抗生素类药物,英文名称:T诨嫌胼拎ね酸相关,其作用机理是直接作用于细菌的核、抑制细菌的C福姑覆荒茉贒双链上引入切口,破坏细菌的代谢和繁殖,迅速杀灭细菌。最初这类药物用于治疗尿道感染,现在已发展到治疗系统感染疾病,并且在动物饲养中作为预防和治疗药物普遍使用。近年来,这些药物在动物组织中的残留已引起广泛的注意。通过将诺氟沙星烷基化合成诺氟沙星衍生物,经过紫外、液质以及核磁共振检测后,采用戊二醛法分别与蚈偶联。再利用活化酯法将五种喹诺酮药物直接与和剂!>贤饧ǎ肟乖氲鞍字实呐剂>晒Α7直鹈庖咄米樱票付嗫隆抗体,经筛选,效价为的诺氟沙星衍生物的抗血清较好。以此抗血清为基础,初步建立了基于多克隆抗体的间接椒ǎ醇觳釷。并通过改变相关的物理、化学影响因素,例如:包括包被溶液、抗体稀释液、封闭液、竞争时间、抗体与标准溶液的体积比等,对椒ń杏呕贓条件下获得更好的结果。优化后,最终得到标准曲线,检测限为/、半数抑制量为/和检测范围为/。此外,还从方法的特异性、准确性、灵敏度来评估了本椒ā;厥章史直鹗ィ湟煜凳∮ァ除与諵的交叉反应低于ネ猓溆諵分别在%和ブ洌多残留椒ḿ觳獾囊G蟆同时建立了猪肉和鱼肉中、、、、、、鹊諵的—狹疢分げ舛ǚ椒ā本方法通过添加回收试验,变异系数测定,表明本方法完全符合目前国内国际上对动物性食品中兽药残留确证要求。关键词:喹诺酮类药物;多克隆抗体;欢嗖辛摘要
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第一章绪论品安全的问题Α=晏乇鸲远镄允称返脑赐贰!K橇稀⑺橇咸砑蛹痢⑹抟┖褪抟椒酪吒9刈ⅰ菜等事件,当一个又一个食品安全“黑幕”被揭开曝光在百姓面前时,人们惊呼:还有多少“问题食品”自然毒素的影响,以及畜牧业中抗生素的应用、基因工程技术的应用,使食品安全成为全世界关注所谓食品安全是指:“对食品按其原定用途进行生产或食用时不会对消费者造成损害的一种担保”,食品的安全性强调食品中不应含有可能损害或威胁人体健康的物质或因素。要求食品绝对安全是不可能的,食品安全一般指相对安全性,是指一种食物或成分在合理食用方式和正常食用量下不否安全,还要取决于食品制作、饮食方式的合理性,适当使用数量,以及食用者自身的一些内在条这其中食品安全的危害点有:农产品种植养殖生产过程中使用农药、化肥、兽药等带来的危害;农作物采收、存储或运输不当,发生霉变或微生物污染;食品加工、存储或运输不当,再次食品添随着对食品安全性认识的深入,疻等国际组织多次召开过各种专家会议,讨论有关食年代开始讨论食品中农药残留;年代开始讨论食品中兽药残留;年开始讨论对动物长期使用抗菌药,特别是作饲料添加剂,会导致细菌耐药性滋生的问题:年建议对转基因食品进行安全评价并对评价的方法开展研究。近年,美国、欧盟、英国、日本等国政府对于兽药和饲料管理法规也进行了许多新改进,主要体现为更全://、饲料添加剂和兽药的安全性,例如增加环境毒性和残留毒理学等。最近还有免疫毒理药期蚱槠冢谏橇稀⑺橇咸砑蛹梁褪抟┑墓こШ脱吵⊥乒懔己玫纳嬖虻取禽畜病瘟;使动物肠壁变薄,有利于养分的渗透和吸收,提高饲料利用率;增进食欲,同时刺激动不仅包括猪牛羊等畜类、鸡鸭鹅等禽类,还包括鱼虾蟹等水产。根据年世界卫生组织统计,全球每年消耗的抗生素总量中,有%被用于食用动物,每年近年来,关于食品安全问题的报道可谓不绝于耳。当人们对“毒奶粉”、“毒粉丝”、“毒泡菜”等一系列食品安全事件记忆犹新、心有余悸的时候,又暴露出苏丹红、光明牛奶、雀巢奶粉、假绿色蔬没有暴露出来褂惺裁炊骺梢苑判牡爻世纪年代以来,由于一系列食品原料的化学污染、疯牛病的爆发、口蹄疫疾病的出现和的问题【拧J称钒踩侍庖丫晌兰拖颜呙媪