2021年论血浆灭活对凝血因子的影响.docx

论血浆灭活对凝血因子的影响

　　摘要： 目标 血浆经白细胞过滤后取新鲜血浆，经亚甲蓝光照处理后过滤比较其灭活前后血浆部分凝血因子活性及白蛋白、球蛋白的改变。方法 新鲜血浆加入浓度/L亚甲蓝，置于荧光照射仪中震荡后取出。用一期分凝固法、比浊法及比色法测定其活性。结论 血浆灭活后对凝血因子活性无显著影响，蛋白回收率＞80％。
　　关键词： 血浆病毒灭活 亚甲蓝 凝血因子
　　血浆是血液成份中病毒危害性较高的一个制品，而现在中国临床上血浆输注量还很大，处理经输血而引发的传染病是较为紧迫的大事，除了加强筛选献血员的质量控制外，对临床用的血液制品进行病毒灭活是一个最为有效的方法。亚甲蓝光化学是一个单袋血浆病毒灭活方法。德国红会于90年代早期开始研究此技术，1992年开始将亚甲蓝处理的血浆用于临床，效果良好。不过血浆灭活处理后血浆中蛋白质功效、凝血因子活性是否满足临床需求，是最为直接的矛盾。
　　1 对象和方法
　　材料 血袋由山东威海高分子血细胞保养液一配方抗凝全血分离储存于PVC血袋中，制成200ml新鲜血浆，病毒灭活柜（山东中保康）ZBK-YBM-01,灭活转移袋（淄博中保康医疗器械有限企业）。
　　器械 ACL200自动血凝仪（cauer美国），pu740分光光度计（becman美国），BH-2荧光显微镜（olympus日本），凝血因子测定试剂均购自conlter企业。
　　方法 （1）新鲜血浆由中心血站采集的血液，6小时内分离的。（2）随即抽取新鲜血浆200ml 15袋，穿刺入加有亚甲蓝的PVC袋内，置于荧光照射中。以强调为万LX荧光照射并连续振满30分钟，取出后过滤，去除亚甲蓝。留取照射前后样品，测定血浆VIII因子活性，血浆部分凝血活酶时间（KPTT），纤维蛋白原（Fg），和血浆白蛋白和球蛋白的含量，血浆VIII因子活性测定采取一期法,Fg测定采取凝固法，血浆白蛋白测定采取比色法，血浆球蛋白测定采取比浊法。
　　2 结果
　　3 讨论
　　在新鲜冰冻血浆所含的很多有效成份中不稳定的凝血因子对理化环境的改变相对较为敏感。 IX:C及纤维蛋白原的回收率作为衡量理化处理对血浆有效成份影响的指标。本试验实经亚甲蓝+荧光处理后的血浆蛋白原，VIII:C和IX:C等凝血因子回收率为＞80％，且荧光照射后血浆蛋白质回收率优于其它光源，这关键是因为血浆经不一样光源照射30分钟后，其血袋表面温度提升，影响蛋白质的功效。而其中经荧光照射后其表面温度为40±2℃，其它光源为60±2℃。这说明亚甲蓝化学处理后血浆中纤维蛋白原及其它凝血因子会有少许损失，但并不影响临床诊疗效果。国外报导多用660nm红光作为亚甲蓝血浆的照射光源，笔者证实用荧光作为照射源，其病毒灭活的效果和对凝血因子的影响和红光无显著差异。试验所用PVC储血袋是现在中国使用最普遍的输血容器，荧光则是常见的照明光源，故用荧光照射盛装于P