倪华 生物显微技术 第三章 染色和组织化学.ppt

染色
活体染色:无毒染料注入动物体内,一定时间后取材,固定切片或铺片观察
台盼蓝,台盼红,墨汁。
固定后染色:
媒染剂:组织—媒染剂---染料复合体。
增强剂:加强染色的选择强度。
加速剂:加强染料的渗透作用。
苏木精(hematoxylin)、伊红(eosin)染色法(HE染色)
苏木精将细胞核染成紫蓝色,伊红将细胞质(浆)染成红色。
苏木精是具有阳离子的碱性染料,可以与具有阴离子基因的组织成分耦合成盐,凡组织结构对苏木精起紫蓝色反应的称为嗜碱性(basophil)。
伊红是具有阴离子的酸性染料,可以与具有阳离子基因的组织伊红起红色分耦合成盐,凡组织结构对伊红起红色反应的称为嗜酸性(acidophil)。对碱性或酸性染料亲和力均不强者,则称为中性。
Delafield 苏木精液
苏木精 4g
无水乙醇 25ml(溶解)
10%铵矾水 400ml,
甘油 100ml,
甲醇或95%乙醇 100ml。
阳光空气中放3-4个月
石蜡切片苏木精染色步骤
切片脱蜡:二甲苯两次,每次10-20分钟。
梯度酒精下行入水:100%--90%--80%--70%--60%--50%--水
苏木精染色10分钟左右,水洗。
分色:1%盐酸的70%乙醇中。使核着色,核以外的成分无色。水洗。
1%伊红的70%酒精复染1分钟
95%乙醇分色
95%乙醇漂洗,无水乙醇脱水。
无水乙醇:二甲苯=1:1 一次
二甲苯两次
加胶封片
HE染色结果
细胞核蓝紫色,细胞质、胶原纤维、肌纤维呈不同色调的粉红色。
进行性染色:
退行型染色:
分色
组织化学
定义
组织化学也称细胞化学,是在组织的原位上显示并研究其化学性质和功能关系的一门科学技术。
组织化学是细胞形态学与化学、生物化学之间的边缘科学。根据已知的化学反应,在细胞原位上以化学反应显示出该细胞中的化学成分、性质、及其变化,从而将结构和机能更紧密的联系在一起。