2021年高效液相色谱法测定依达拉奉注射液中依达拉奉及相关物质的含量依达拉奉注谢液说明书.docx

高效液相色谱法测定依达拉奉注射液中依达拉奉及相关物质的含量依达拉奉注谢液说明书

　　 　　摘要 目标 建立测定依达拉奉注射液中依达拉奉及相关物质含量的高效液相色谱法HPLC。 方法 采取Cromasil C18柱250 mm× mm，5 μm，流动相：甲醇- mol/L磷酸二氢铵溶液50：50用20%磷酸调整pH值至±；流速： ml/min；检测波长：239 nm；柱温：30℃。 结果 在该色谱条件下，依达拉奉和样品中杂质可完全分离；在～ μg/ml 范围内，峰面积和其浓度线性关系良好r = ，n = 5，平均回收率为%RSD = %，n = 9，最低检出量为 ng。 结论 本法操作简便快速，正确可靠，专属性强，可用于依达拉奉注射液中依达拉奉及相关物质的测定。
　　关键词 依达拉奉；HPLC；含量测定；相关物质
　　中图分类号 文件标识码 A 文章编号 1674-4721202107c-0061-04
　　依达拉奉edaravone，3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮为强效自由基清除剂，于2021年在日本上市，临床上关键用于诊疗急性缺血性脑卒中1。作为第1个新型氧自由基清除剂，含有清除自由基、抑制脂质过氧化及减轻缺血脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化和再灌注损伤的作用，并可阻止脑水肿和脑梗死进展，改进因急性脑梗死所致的神经症状、日常生活活动能力和功效障碍2。多年来，相关依达拉奉诊疗肌萎缩侧索硬化症、帕金森病等的临床研究正在进行中，抗癫痫和抗类风湿性关节炎在临床实践中被发觉，其对人类多个疾病的有效性说明此药含有宽广的开发前景3。本研究依据依达拉奉的结构特点和化学性质，参考相关文件4-7，建立了高效液相色谱法high performance liquid chromatography，HPLC测定依达拉奉注射液中依达拉奉及相关物质的含量，本方法能将供试品中主峰和相关物质峰完全分离，且能有效检出依达拉奉注射液中所含杂质，含有专属性强、灵敏度高、选择性好、简便、正确等特点，可有效地应用于依达拉奉注射液的质量控制。
　　1 仪器和试药
　　仪器
　　岛津LC-15C高效液相色谱仪，SPD-15C紫外-可见光检测器日本岛津企业，CTO-15C色谱柱柱温箱日本岛津企业，Lcsolution 15C 工作站日本岛津企业，SIL-10AF自动进样器日本岛津企业；UV-2450紫外分光光度计日本岛津企业、AUW120D 岛津分析天平。
　　试药
　　甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。依达拉奉对照品批号：100620-202101；含量100%，中国药品生物制品检定所；依达拉奉注射液福寿堂制药有限企业；规格：20 ml∶30 mg；批号：110911、110913、110915。
　　2 方法和结果
　　色谱条件和系统适用性试验
　　色谱柱：Cromasil C18柱250 mm× mm，5 μm；流动相：甲醇- mol/L磷酸二氢铵溶液50∶50用20%磷酸调整pH值至±；流速 ml/min；检测波长：239 nm；柱温：30℃；进样量：20 μl8-9。
　　对照品溶液的制备
　　取依达拉奉对照品适量，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每毫升中约含30 μg的溶液。
　　供试品溶液的制备
　　精密量取依达