【公共卫生微生物采样.检测方法总结】 水中微生物检测方法.doc

【】 水中微生物检测方法
一、空气中微生物的检测方法------细菌总数
（营养琼脂，121℃高压灭菌20min，培养时间37℃,48h）

（1）撞击法(二级或者六级微生物采样器)
（2）自然沉降法（暴露5min）
采样：梅花布点，高度：~；离墙：1m。
二、茶具微生物检验方法
（一）细菌总数
1、生理盐水的制法：将氯化钠（）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。
2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（1~），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。
3、检验程序：
检样→各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）→37℃，48h培养→菌落计数→报告
4、：cfu/cm2。
（二）大肠菌群
1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115℃高压灭菌15min）
2、检测方法：发酵法（具体内容课本11页）
3、检样（测定细菌总数余下的样品）
4、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色）
（1）初染：1min，水洗；
（2）碘染：1min，水洗；
（3）脱色：30s，水洗；
（4）复染：1min，水洗，待干，镜检。
5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。
三、毛巾、床上卧具微生物检测方法
（一）细菌总数

（1）毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；
（2）床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；
2、检测程序同茶具细菌总数检测
：cfu/25cm2。
(二)大肠菌群（检测程序同茶具大肠菌群检测）
：（用测定细菌总数时采集的样品）
四、理发用具微生物检验方法
（一）大肠菌群
1、采样
推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；
理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。
2、检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管，37℃，24h培养；
3、分离培养：接种伊红美蓝平板，做革兰氏染色镜检；
4、证实试验：接种乳糖发酵管37℃，24h培养，观察产气情况。
5、结果报告：乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，可报告为大肠菌群阳性。
（二）金黄色葡萄球菌
1、培养基：%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基
2、步骤：
（1）做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中，37℃，24h培养；
（2）接种血平板，37℃，24h培养；观察形状：圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈；
（3）挑菌落做镜检：革兰氏阳性（红色），葡萄状排列；
（4）甘露醇发酵试验：接种到甘露醇发酵培养基中，37℃，24h培养，观察是否产酸；
（5）血浆凝固酶试验
玻片法：在干净的玻片两边，一端滴一滴生理盐水，一端滴一滴血浆，接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性；若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有，则为阳性。
五、拖鞋微生物检验方法
霉菌与酵母菌
（生理盐水中要加入玻璃珠）