聚乳酸聚乙醇酸RNAⅢ抑制肽缓释微球制备和预防骨科内植物葡萄球菌感染实验研究.pdf

中国人民解放军军医进修学院;中国人民解放军总医院
博士学位论文
聚乳酸聚乙醇酸/RNAⅢ抑制肽缓释微球的制备和预防骨科内植
物葡萄球菌感染的实验研究
姓名:张小斌
申请学位级别:博士
专业:骨科学
指导教师:王继芳;郝立波
20080530
聚乳酸聚乙醇酸/笠种齐幕菏臀⑶虻闹票负驮し拦强颇植物表面葡萄球菌感染的实验研究中文摘要骨科内植物感染一直是个棘手的问题,人工关节置换术后感染更是灾难性的并发症,,由于细菌耐药问题越来越严重,所以迫切需要更加有效的方法来治疗耐药菌引起的骨科内植物尤其是人工关节感染。研究证明梢砸种扑衅咸亚蚓甑亩拘裕且恢肿饔机制不同于传统抗菌素的全新制剂,本研究采用固相合成法、反相液相色谱法合成并提纯得到高纯度牧几慈橐蝗芗粱臃⒎ㄖ票窹疪缓释微球,分析其表征;体外研究/菏臀⑶虻南刺嵫卣骱鸵忠鸹钚裕对/菏臀⑶虻淖橹嗳菪院脱R合嗳菪越衅兰郏辉谇捌谑笛榈幕础上建立全新的兔膝关节置换术后慢性感染的模型,以期真实模拟俅采铣见的慢性感染,研究/菏臀⑶:根据已知的氨基酸序列,采用固相合成法合成制罚梅聪喔咝б合喾ǘ訰粗品进行纯化,⑶颍鄄炱表征,。通过/释系统对金黄色葡萄球菌囊种疲舛ㄆ溆行б志分本叮冉不同时点洗提液抑菌环直径大小,:选择溶血实验、凝血实验、血小板聚集实验,测定凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间、观察/菏臀⑶蚨酝冒紫赴⒑煜赴脱P“宓挠跋欤訮疪的方法目军医进修学院博士论文
、,对聚乳酸乙醇酸/:在前期实验的基础上建立全新的兔膝关节置换术后慢性感染的模型,测定白细胞、环从Φ鞍住⒉±硌Ъ觳椤⑸璧缇倒鄄旌图す夤簿劢股杓查,研究/菏臀⑶蛟谔迥谠し辣砥て咸亚蚓斐傻耐孟ス亟谥没皇后慢性感染的效果。果疪缓释微球的构建和体外洗提学研究:采用固相合成的方法可以合成得到稳定的聪喔咝б合喾ù炕傻玫酱慷任%的多肽,通过质谱分析、氨基酸组成分析、氨基酸序列分析、⑶蛄>毒取⒈砻婀饣包封率约为,,天累积释药动力学方程为.,均符合匠蹋墙衔@硐氲幕菏驮匾┨逑担外抑菌实验表明/菏臀⑶蚓哂幸志钚浴疪缓释微球的血液相容性和组织相容性研究:溶血实验、凝血实验和血小板聚集实验,凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间测定证实了/菏臀⑶蚨酝玫娜苎!DJ奔洌P“寰奂约鞍紫赴煜赴和血小板地数量均无明显影响,具有良好的血液相容性;急性毒性试验、细胞毒性试验、肌肉内植入试验、过敏试验及热原试验证实了/菏微球不引起全身毒性反应,无细胞毒性,未见免疫排斥,不引起过敏反应,无热源性,:通过白细胞计数、环从Φ鞍住⒉±硌Ъ觳椤⒂ü庀晕⒕怠⑸璧缇岛激光共聚焦扫描证实,,而/菏结军医进修学院博士论文
结论微球在局部持续释放,可以预防持续存在的小剂量致病菌造成的兔膝关节置换术后慢性感染。采用固相合成法和反相高效液相色谱法可以制备高纯度的铣傻哂杏胩烊籖才同的结构组成和抑茵活性;采用改良复乳一溶剂挥发法制备的/菏臀⑶蛄>毒取⒈砻婀饣饴屎驮匾┞式细撸逋馐放动力学符合匠蹋抢硐氲幕菏驮匾┨逑怠疪缓释微球具有良好的血液相容性和组织相容性,可以安全地应用于关节局部。术后兔膝关节每天注入谋砥て咸亚蚓鶤菌液钪栈岬贾率验动物发生慢性感染,鳳疪缓释微球在局部持续释放,:;换菏停黄咸亚蚓簧锉荒ぃ荒谥参铮桓腥军医进修学院博士论文
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