迟缓爱德华氏菌糖基转移酶MltA功能研究.pdf

⋯一一支恼谨以此论文献给所有在科研道路上和生活中曾给予我关心和帮助的人们
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雃告一迟缓爱德华氏菌糖基转移酶的功能研究生答辩委员会成员签字学位论文完成日期:指导教师签字\
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崎旺,学位论文作者签名:乒,蚣学位论文作者签名:备腴砝签字日期:弘籫月签字日期:月『日学位论文版权使用授权书独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方丹,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得￡壁艹蹦ń贵荒ü移巨心盐:主拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑な槭褂霉牟牧稀S胛摇ぷ的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎适用本授权书学位论文作者毕业后去向通讯地址工作单位电话邮编日字期签师导簦
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阐释砌迟缓爱德华氏菌糖基转移酶的功能研究摘要明确。为了预防和治疗迟缓爱德华氏菌病,深入地研究尉鲋含有自杀质粒的缺失突变株。通过将携带有卡那霉素抗性基因迟缓爱德华氏菌是目前水产养殖业中具有极大危害的革兰氏阴性病原菌。其宿主范围广,从鱼类、两栖类、爬行类直到哺乳类都有该菌烁吃斐删薮笏鹗猓还是一种重要的人畜共患病病原菌,也是爱德华氏菌属中唯一感染人类的成员,对人类的健康造成了威胁。闹虏⌒允艿蕉嘁蛩氐牡骺兀渲幸恍┒型分泌系统、生物膜的形成、上皮细胞的侵染。然而,关键性毒力因子尚不闹虏』硎十分有必要的。糖基转移酶是一类自溶素,能够切割肽聚糖灰阴0谒岷蚇一乙酰葡糖胺之间的,擒占纬,二酸酐胞壁酸残基。根据氨基酸序列相似性和一致性基序,已知和假定的糖基转移酶被划分为四类。迄今为止,糖基转移酶已经被证实参与许多细胞过程,包括细胞生长和分裂、细胞壁再生、运动性、药物抗性、基因组注释显示存在一个假定的膜绑定的糖基转移酶基。该基因被预测编码含有霭被岬牡鞍祝玫鞍椎腃末端有一个结构域,该结构域与大肠杆菌糖基转移酶械腃末端结构域有%的一致性。因此,该基因被命名为,假定蛋白被预测具有糖基转移酶的功能。为了蠱墓δ埽狙芯渴紫裙菇丝蚰趍笔槐渲闍和过量表达菌株蝗缓蠓直鸨冉先笔槐渲辍⒐勘泶锞旰鸵吧暝生物表型、抗生素敏感性和致病性等方面发生的变化。本研究利用重叠陀勺陨敝柿榈嫉亩瓮粗刈槌晒菇缺失突变株山痶J紫壤肞扩增得至/的上下游片段;:将得到的质粒依次转感染的病例报道:更为重要的是,力相关园子已经被证实,包括摄铁系统、溶血素、吞噬细胞毒杀作用、秃蛋白分泌、分化和致病性。入大肠杆菌笥搿晡鉾吧闑薪雍希唤犹ㄗ又械重组质粒与基因组发生二次同源重组后,用含有%蔗糖的桨迳秆〉玫讲因
缺失突变株后成功构建了过量表达占饥辍注射实验表明,合成量增加的低分子量銮苛薊扎园呗碛愕闹虏⌒浴和完整ㄆ舳忧的片段的低拷贝质粒缱;雖研究结果表明:在抗生素敏感性试验中,一定浓度的氪苄青霉素促进野生株然而却明显抑制过量表达菌株中的表达:与野生株相比,。在压力存活实验中,畉中的失活和过量表达均降低了该菌在寡营养和高渗透压环境下的生存能力;在存在时,与野生株相比缺失突变株的自溶率下降,然而过量表达菌株的自溶率显著提高。野生株和缺失突变株的生长速度井无明显差异,然而过量表达菌株与前两者相比生长速度略微降低。在泳动性实验中,与野生株相比,脑硕芰ο灾銮慷鳤的运动能力有所减弱。在生物膜实较小,并且三株菌均不能在垂死斑马鱼内脏组织表面形成可观察到的生物膜。腊多糖的狿缬痉治鱿允荆胍吧晗啾龋珹在几种低分子量暮成上有所下降,而的过量表达则导致另外两种低分子量暮铣稍黾樱籐著性差异:腖档土肆礁鍪考叮虏⌒韵灾銮俊R陨辖峁砻魈基转移酶对占鴗抵抗内酰胺类抗生素和环境压力、自溶、脂多糖合成和致病性方面起到重要作用。本研究首次报道了迟缓爱德华氏菌具有毒力相关功能,为进一步研究迟缓爱德华氏菌的致病机理奠定了基础。关键词:迟缓爱德华氏菌、糖基转移酶基癿/、框内缺失突变、过量表达、致病性验中,野生株、蚼在体外形成生物膜的能力虽存在