mcl1参与hbx和游离脂肪酸诱导细胞凋亡作用机制研究.pdf

第二军医大学
博士学位论文
Mcl-1参与HBx和游离脂肪酸诱导细胞凋亡的作用机制研究
姓名:胡良
申请学位级别:博士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:王红阳
20090501
中文摘要第一部分参与盏枷赴蛲龅淖饔没蒲芯研究背景和目的持续腥臼遣《疽鸬陌愿窝住⒏斡不仍谀诘穆愿尾〉闹要原因,并与肝细胞癌姆⑸⒄姑芮邢喙兀谖夜鶫感染是最主要的病因。在《舅嗦氲牡鞍字校琣蛋白是墙峁够虮码的多功能病毒调控蛋白,参与母腥尽⒏粗频纫幌盗兄虏」蹋⒍愿细胞的增殖、凋亡、代谢、应激、迁移等多种生物学功能具有广泛而复杂的影响,被认为是盏几伟┓⑸讨凶钪饕5木龆ㄒ蛩刂唬淙非兄虏』仍有待进一步阐明。越来越多的证据表明凋亡是《居辗⒙愿尾〉闹匾介质,相关研究发现梢栽銮扛蜗赴缘蛲鲂藕诺拿舾行浴U庑┲ぞ萏崾我们赡芡ü俳蜗赴蛲鍪迪制溆辗⒏伟┑淖饔茫鳫促进肝细胞凋亡的具体机制目前尚无定论。家族是细胞内调节凋亡与存活的最重要的一类蛋白家族,家族成员同时包括抗凋亡和促凋亡分子。其中.,⑾,参与胚胎发育、造血干细胞内稳态的维持,以及细胞凋亡的动态调控。但是,是否参与盏几蜗赴蛲霾⒃谄渲蟹⒒又匾W饔媚壳肮本研究从细胞和转基因动物水平观察谋泶锒匝趸ば藕庞盏嫉母在何种水平、以何种方式调节的表达;再结合腺病毒介导的过表达技术,阐明在盏枷赴蛲鲋械淖饔茫徊⒔℉和过表达及干扰质粒、、筛选建立榷ㄏ赴担内外均未见有系统报道。细胞凋亡敏感性的影响,同时观察在此过程中表达水平的改变,明确参与陀卫胫舅嵊盏枷赴蛲龅淖饔没蒲芯
转基因小鼠肝氧化应激刺激模型,运用组织腿ü魇较赴际豕鄄焖彩北泶锖臀榷ū泶颒的细胞系对氧化应激信号敏感性的变化;üü馑孛副ǜ婊蚴笛椤蛂畉际跻约癢方法分别观察表达南赴翟谘趸ば藕疟┞、转录水平及其蛋白质水平的影响;褂猛诽匾煨砸种萍潦笛榭U笻对表达调节的机制研究;擞糜ü┗颊甙┳橹蠬与瓾明显增强细胞对氧化应激信号诱导凋亡的敏感性,在此过程中伴随蛋白水平的下调;,并不受细胞系的影响;瓾下调蛋白主要发生在翻译后水平;;瓾主要通过诱导细胞内灾黾樱せ頲进而加速降解蛋白实现其促凋亡作用的;瓾转基因小鼠肝脏缺血再灌注处理后肝组织中蛋白水平下降,同瓾阳性肝癌患者癌组织中与谋泶锼酱嬖诟合喙亍结论本研究发现銮扛蜗赴匝趸ば藕庞盏嫉蛲龅拿舾行灾饕Mü著增加胞内罨痗进而加速蛋白降解来实现。。关键词:乙肝病毒鞍祝凰柘赴馨土觯;;活性氧基团;肝细胞肝癌在盏嫉南赴蛲鲋械淖饔茫表达的相关性。结果时伴随肝细胞凋亡明显增加;第二军医人学博十学位论文
第二部分参与游离脂肪酸诱导细胞凋亡的作用机制研究研究背景和目的大量研究表明非酒精性脂肪肝是与肥胖、Ⅱ型糖尿病、高脂血症以及代谢综合征等疾病病程进展密切相关的代谢性疾病。近年来由于生活方式、饮食结构等的改变,非酒精性脂肪肝的发病率不断增加,目前已成为全世界范围内最常见的肝脏疾病,越来越受到人们的重视。然而,由于非酒精性脂肪肝的病因非常复杂,导致至今仍不清楚其确切的发病机制,因而也缺乏有效的治疗手段。游离脂肪酸是肝脏甘油三脂的主要来源,目前认为游离脂肪酸是引起肝脏脂毒性的重要介质,并在非酒精性脂肪肝的发病和病程进展中具有重要作用。研究发现,非酒精性脂肪肝病理学的重要特点是肝脏细胞凋亡显著增加。然而,对于游离脂肪酸如何诱导肝细胞发生凋亡的具体机制目前不十分清楚,仍有待进一步近年来研究表明,家族中的作为其家族中一个重要的抗凋亡成员,在肝细胞的生存与凋亡的调控中发挥重要作用,然而是否参与游离脂肪酸诱导肝细胞凋亡并在其中发挥重要作用目汗谕馕醇喙乇ǖ馈本实验首先观察游离脂肪酸诱导肝细胞凋亡过程中表达的改变,然后结合腺病毒介导的过表达及干扰技术,明确在游离脂肪酸诱导的细胞凋亡中的作用,并进一步阐明游离脂肪酸调节表达的分子机制。甒实验检测游离脂肪酸诱导细胞凋亡过程中蛋白水平的际跫觳庥卫胫舅岫訫一B妓降挠跋欤擞孟俨《;。《荆ü觳鈉活性和技术明确游离脂肪酸对凋亡的影响;改变;参与陀卫胫舅嵊盏枷赴蛲龅淖饔没蒲芯畆畉
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