实验二 细菌人工培养PPT课件.ppt

实验二
细菌的人工培养
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实验目的
了解人工培养基的制作。
了解细菌的接种方法
分离培养方法——平板划线法
（混合菌液）
了解细菌的生长现象
液体、固体、半固体培养基
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一、人工培养基的制备和种类



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（1）适当的营养成分；
（2）合适的酸碱度；
（3）配制后经灭菌使之无菌，方可应用。
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配料→熔化→测定及矫正PH→分装→灭菌→备用
配制方法
（1）称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于烧杯中。
（2）溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中，用玻棒搅拌，使药品全部溶化。
（3）调pH 用1mol/L 。
（4）定容 将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。
（5）加琼脂 加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。
（6）分装、加塞、包扎。
（7）高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
LB培养基的配制：
成分：胰蛋白胨(tryptone) 10g、酵母提取物(yeast extract) 5g
氯化钠(NaCl) 10g、固体培养基另加 琼脂粉 15-20g，加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH（），121℃灭菌30min。
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按物理状态不同划分
固体培养基
液体培养基
在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，%-%
%-%
不加任何凝固剂
半固体培养基
固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏
观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定
用于增菌，大规模工业生产及在实验室进行微生物的研究

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按用途不同划分
基础培养基
鉴别培养基
含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物。比如 肉汤培养基。
选择培养基
利用细菌代谢产物不同而使指示剂显色反应不同的原理，鉴别和鉴定细菌。如麦糠凯琼脂培养基。
营养培养基
在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。如SS琼脂培养基。
在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如血琼脂培养基。
特殊培养基
如厌氧培养基。用于厌氧菌的培养。

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二、细菌的接种技术
分离培养接种法——平板划线法、平行划线法
纯种细菌接种法 ——固体斜面培养基接种法
液体培养基接种法
半固体培养基接种法
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无菌操作：
在无菌箱或操作室内无菌的环境下进行
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