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细胞膜通透性实验报告
山东大学实验报告 2015年 4 月 23日
姓名 班级 13级生命基地班 学号 同组者:
科目 细胞生物学实验 实验题目 细胞膜通透性实验
【实验题目】
细胞膜通透性实验
【实验目的】
1、观察溶血现象并掌握其发生机制。
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
【实验材料与用品】
1. 试剂:% NaCl溶液、% NaCl溶液、、
液、6% 葡萄糖溶液、2% TritonX-100
2. 器具:离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机
3. 材料:鸡血红细胞
【实验原理】
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障,它是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,通透性高(肾小管、肠上皮、植物根细胞更高),水分子可以从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散,这种现象称为渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。
1. 溶血现象
将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内使细胞涨破,血红蛋白释放到介质当中,介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液(此时的细胞膜收缩,会略有不溶性内容物),这种现象称为溶血。
红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血,但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同,时间久了,膜两侧的渗透压平衡会被打破,也会发生溶血。
由于各种溶质透过细胞膜的速度不同,因此发生溶血的时间也不相同。发生溶血现象所需的时间,可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。即溶血时间对应着穿膜速度。
2. 物质穿膜运输的类型
(1)被动运输(不耗能)
被动运输分为简单扩散(顺浓度梯度扩散)和协助扩散。(通道:载体蛋白、通道蛋白)
(2) 主动运输(耗能)
需要跨膜载体蛋白的协助,这些载体蛋白起到泵的作用,有选择性地把专一溶质逆浓度梯度的穿膜运输。
3. 影响物质穿膜通透性的因素
(1) 脂溶性越大的分子越容易穿膜(非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质)
(2) 小分子比大分子更容易穿膜(小的非极性分子,如O2 、CO2等)
(3) 不带电荷的分子容易穿膜(离子难溶于脂质物质,离子带水膜使体积增大)
(4) 亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜蛋白
【实验步骤】
1. 大体流程
6只试管分别滴加50%红细胞悬液1滴
取6只试管分别加入等量的不同溶质
配置50%的鸡血红细胞悬液
在显微镜下观察细胞形态
混匀后,观察并记录溶血时间
2. 具体操作
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