形态学实验报告.docx

形态学实验报告.docx小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验
摘要：【目的】1通过可移植性小鼠腹水肝癌淋巴道转移实验，从感性上认识肿瘤侵袭与淋 巴道转移的生物学特性，了解肿瘤动物实验模型建立的过程及意义。2进一步了解动物尸体 解剖、组织取材、染色的过程。3强化科研思维的培养及实验技能的训练。【方法】获取小 鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞株（Hca—F）后经615小鼠右腋皮下皮下接种10只，固定， 切片，染色，镜下观察转移组织及淋巴结转移的分布与转移率。【结果】小鼠存活率70%, 小鼠肝癌腹水型细胞株Hca-F淋巴结转移率100%分布于颈部淋巴结，腹股沟淋巴结，锁骨 上淋巴结。
关键词：淋巳道转移肝癌Hca-F小鼠
肝癌高复发转移率已成为制约其提高预后的瓶颈，因此研究肝癌转移机制具有重要意义 鉴别肿瘤细胞不同转移能力的特征，是肿瘤诊断、 是上皮来源的恶性肿瘤的主要转移途径，临床上已将区域性淋巴结转移视为影响恶性肿瘤患 者预后的最重要因素。：1990年大连医学院病理学教研室从小鼠腹水型肝癌淋巴道转移细胞 系Hca-F25/L中分离出具有淋巴道不同转移能力的两株瘤细胞，其中高转移克隆株Hca- F（16A. 3 — F_3）淋巴结转移率为78. 6% — 89. 4%被广泛应用于肿瘤淋巴道转移机制研究 及药物筛选。对深入研究肝癌转移和复发机制，寻求有效的抗转移和复发的治疗措施具有重 要现实意义.
1材料与方法：
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：高转移力小鼠腹水型肝癌细胞，由大连医科大学病理教研室建株并保存。
：近交系615小鼠，雌雄兼用，6—8周龄，体重18—22g,由大连医科大学 实验动物中心提供。
：搪瓷盆、温度计、离心管、lml注射器、手术刀、眼科手术剪、眼 科手术镶、乳胶手套、生理盐水、1%来苏儿溶液、75%酒精棉、10%甲醛固定液等。
。从液氮罐中取出高转移力小鼠腹水型肝癌细胞塑料冻存管， 立即放入40度的温水中，一分钟内使冻存液全部融化，拉力机送入无菌室中。取出细胞悬 液放入离心管中，有生理盐水洗涤2次，离心，弃上清，在加lml生理盐水吹打均匀。向小 -F细胞悬液，于第6天无菌条件取腹水。
615小鼠脚垫接种肿瘤细胞。,接种于615小鼠脚垫上。定 期观察肿瘤生长及淋巴结肿大情况。四周后处死全部小鼠，取瘤体及相关淋巴结，同时观察 肺、肝、肾等器官。将上述组织固定于10%甲醛固定液中，石蜡包埋制片，HE染色，显微 镜检查。。将皮下瘤体、淋巴结、肺、肝、肾选取病变部位，切成厚2—3mm 的小于2cmXlcm大小的组织块，10%中性甲醛固定。小块组织一般固定数小时，较大标本 需固定24-48小时。经冲洗（用递升浓度的酒精等）、透明（用二甲苯等）、浸蜡（用石蜡）， 然后用石蜡将组织包埋成蜡块，再经切片机切片和染色制成切片。一般常规作苏木精-伊红 染色。
。将皮下瘤体、淋巳结、肺、肝、肾选取病变部位，切成厚2—3mm的小于 2cmXlcm大小的组织块，10%中性甲醛固定。小块组织一般固定数小时，较大标本需固定 24—48小时。经冲洗（用递升浓度的酒精等）、透明（用二甲苯等）