比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量.doc

比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量比色法测定薯蓣丸中薯蓣皂甙元的含量更新日期: 2010-05-02 点击: 敖冬梅陈树和刘焱文胡俊姚亦之薯蓣丸是由薯蓣、当归、桂枝、人参、干地黄等 21 味中药组成。具有调理脾胃, 益气和营的功效。薯蓣为本品方中君药, 主要含皂甙类成分, 其甙元为薯蓣皂甙元。为了控制本品的质量, 以薯蓣皂甙元为对照,采用比色法对本品中薯蓣皂甙元进行含量分析。 1 仪器与试药 uv-210A 型紫外分光光度计,薯蓣皂甙元对照品( 中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用) ,显色剂: 5% 香草醛溶液(500g 香草醛溶于 10ml 冰醋酸;新鲜配制) 和高氯酸 。其他试剂均为分析纯。 2 供试液的制备对照溶液的制备: 精密称取薯蓣皂甙元标准品 ,置 10ml 量瓶中,加氯仿使之溶解后,定容至 10ml ,摇匀,备用。供试品溶液的制备:取本品 2 丸,研磨混匀,精密称取 , 加适量硅藻土拌匀, 置索氏提取器中, 加甲醇适量, 加热回流提取至无色。将提取液定量转移至蒸发皿中,水浴蒸干,残渣用 3mol/L 盐酸溶液溶解,定量转移至三角锥瓶中,加 3mol/L 盐酸溶液至 50ml , 加热回流水解 2 小时,放冷,用石油醚(30 ~ 60℃) 萃取 5 次,每次 30ml , 合并石油醚液, 水洗至中性, 回收石油醚至干, 加氯仿适量溶解,定量转移至 10ml 容量瓶中,用氯仿定容至 10ml ,摇匀,备用。 3 方法与结果 实验条件选择分别取对照品溶液,供试品溶液各 ,依法显色,在 200 ~ 600nm 区间扫描测定,对照品溶液与供试品溶液的最大吸收波长约 451nm 。 标准曲线的制备精密吸取薯蓣皂甙元对照品溶液 , , , , ,置 10ml 容量瓶中,挥尽溶剂,分别精密加入 5% 香草醛溶液 和高氯酸 ,置 70℃水浴上不断振摇保温 20 分钟,迅速冷却,加冰醋酯稀释至刻度,摇匀,备用。以 5% 香草醛溶液 和高氯酸 ,加冰醋酸稀至刻度的溶液为空白,在 451nm 波长处测定吸收度。以浓度(c, mg) 为横坐标, 吸收度为纵坐标,绘制标准曲线。结果见表 1。表1 浓度与吸收度的关系浓度(mg) 吸收度 结果表明,薯蓣皂甙元在 ~ 范围内,吸收度呈良好线性关系,其回归方程为 A=+ ℃, r= 。 样品测定取本品份,照供试品溶液制法制成供试品液,分别吸取上述供试液各 , 对照品溶液 ,置 10ml 量瓶中, 挥尽溶剂,分别精密加入 5% 香草醛溶液 和高氯酸 ,置 70℃水浴上不断振摇,保温 20 分钟,迅速冷却,加冰醋酸稀释至刻度, 摇匀, 备用。在 451nm 波长处测定吸收度。按对照品比较法计算含量, 结果见表 2。表2 样品测定结果样号薯蓣皂甙元含量(mg/g ,以薯蓣皂甙元计) (mg/g) CV (%) 1