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血糖定量.ppt


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文档列表 文档介绍
血糖定量
——Folin-Wu法测定血糖浓度
~ 或109mg以下。空腹血糖大于7mmol/L。 140mg以下。标准糖尿病的诊断依据是血糖和临床症状。1999年WHO: 静脉(全血) 毛细血管 静脉(血浆) :(糖尿病) 空 腹 ≥ ≥ ≥ 或126mg服糖后2h ≥ ≥ ≥ 或200mg以上。
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一、实验目的
掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法
二、实验原理
无蛋白血滤液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,Cu2+即被血滤液中的葡萄糖还原成Cu+(Cu2O) ,Cu2O又使钼酸试剂还原成低价的兰色钼化合物。血滤液的糖含量和产生的Cu2O量成正比,Cu2O的量与形成钼化合物的量成正比,可用比色法测定。
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三、材料、仪器与试剂

动物血液。全血为鸡血。 1只鸡,称1g草酸钠,边滴边拌匀。

分光光度计、血糖管、奥氏吸管、水浴锅、表面皿、三角瓶、漏斗等。

(1)标准葡萄糖溶液:
①1%葡萄糖母液:,溶于蒸馏水,稀释至100ml;
②葡萄糖标准液:,加蒸馏水至刻度
(2)碱性硫酸铜溶液
A液:无水碳酸钠35g,酒石酸钠13g,碳酸氢钠11g溶于蒸馏水后,稀释至约700ml,待溶液清晰后再稀释至1000ml。
B液:晶体硫酸铜5g,溶于蒸馏水并稀释至100ml,加浓硫酸数滴作保护剂。
临用时,取A液25ml,B液5ml,混合后,再加A液至50ml,摇匀。并冰箱内可保存。
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(3)酸性钼酸盐溶液:
称取钼酸钠600g,加少量蒸馏水溶解后倒入2000ml容量瓶,定容,摇匀,倒入一较大的试剂瓶中,,摇匀,静置数小时。取上清液500ml到1000ml容量瓶,徐徐加入225ml85%磷酸,边加边摇匀。再加25%硫酸150ml,放在暗处至次日,用空气将剩余的溴赶去,然后加99%醋酸75ml,加蒸馏水稀释至1000ml,贮存于棕色瓶中。
(4) 10%钨酸钠溶液:
钨酸钠10g溶于蒸馏水并稀释至100ml。
(5) :
于53ml蒸馏水中加入1ml浓硫酸。
(6)抗凝剂:(草酸钠或草酸钾)
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四、实验操作流程
Ⅰ.无蛋白血滤液的制备:
注:用奥氏吸管吸全血较困难,可用普通的1ml移液管代替。
全血(已加抗凝剂)1ml 50ml三角瓶
H2O 7ml 血液变为红色透明
10%钨酸钠1ml
H2SO4 1ml---->充分沉淀---->过滤---->滤
(随加随摇,加完后充分摇匀) (鲜红→暗棕红色)
液(清的无色滤液,不含蛋白质)
摇匀
摇匀
5
Ⅱ.血糖测定
取3支血糖管编号,然后在血糖管中按下表操作。
血糖管号
试剂
1号(空白)
2号(标准液)
3号(样品)
无蛋白滤液(ml)
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0
1.

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  • 时间2021-07-21
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