高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证.doc

高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证.doc高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证
除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需 121C高 压灭菌 15-30 分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底， 直接关系到试验结果。 因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。
1 ．试验材料
嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌 ( Bacillus stearothermophilus)
ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量 5-105 CFU/片。
121C压力蒸气灭菌化学指示卡。
⑶ 溴甲酚紫胨水培养基116C高压灭菌20分钟后备用。
⑷ 0-150C留点温度计。
2．方法与结果
将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片 (以下简称菌片) 用无菌镊子放人密封试管中。 化 学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备 5-10 份。分别放 置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间 5 处。 如灭菌器为二层，则需放 10 处。
留点温度计标化合格后方可用于验证试验。 检测前，需将温度计的水银柱甩 至40C以下。每次监测后留点温度计的温差应存 1C之间，则说明灭菌器内的温 度分布是均匀的。
灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基 内56-60C培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的 嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活， 细菌仍可在培养基中生长， 分解葡萄糖产酸变 为黄色。 如培养基颜色不变化仍为紫色， 则说明芽胞已灭活。 同时要用未经灭菌 的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。
化学指示卡上的指示色块， 在高压蒸气灭菌时， 由淡黄色变为黑色。 随着颜 色变化的深浅， 并与对照色相比， 可判断灭菌效果是否达到要求。 化学指示卡应 在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。
高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进