原卟啉原氧化酶催化机理及其抑制动力学的研究.pdf

⑨一⋯硕士学位论文原卟啉原氧化酶催化机理及其抑制动力学研究论文作者:王志芳指导教师:杨光富教授席真教授学科专业:农药学研究方向:化学生物学农药与化学生物学教育部重点实验室华中师范大学化学学院年
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⑨作者签名:了乏芳乡作者签名::训晁暝定享受相关权益。回童途塞握窒卮澄后┳簦坏生股卟椋华中师范大学学位论文原创性声明和使用授权说明学位论文版权使用授权书原创性声明日期:∞年土月卅日日期:知,阩月≥本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者完全了解华中师范大学有关保留、使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华中师范大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许学位论文被查阅和借阅:学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑保密论文注释:本学位论文属于保密,在..年解密后适用本授权书。非保密论文注释:本学位论文不属于保密范围,适用本授权书。日期:刀¨年岁月喝导师签名:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布,并可按“章程”中的规硕士学位论文’
⑧摘要菌和细菌中。在原卟啉原氧化酶的催化作用下,无色的原卟啉原Ⅸ被氧化,失掉六个电子生成共轭的光敏性物质原卟啉Ⅸ。该酶的缺损会造成显性遗传疾病——,其广泛存在于动物、植物、真研究表明原卟啉原氧化酶定位在叶绿体和线粒体中,对于叶绿素和亚铁血红素的合成具有重要的作用,这就决定了它在生命体系中具有重要的意义。在人体中,琕的产生,这种病又称杂色卟啉病,为一种常染色体显性遗传疾病。这种疾病患者的数量和发病地域正在不断扩大,因此对该酶的研究具有重要的医学意义。在植物体内,原卟啉原氧化酶是光依赖性除草剂的作用靶标,除草剂与底物竞争性抑制的结果会导致绿色植物组织的干枯与白化,从而死亡。这在研发新型的抑制剂上引起了农药学家的关注,因而对该酶的研究具有重要的农学意义,我们希望从酶水平利用分子生物学手段,研究抑制剂与酶的作用机制,从而指导新型抑制剂的合成与研发。基于原卟啉原氧化酶在医学和农学中的重要性,我们主要进行了以下四方面的工作:一、通过对多种蛋白晶体培养条件的摸索优化,对人体褰信嘌到了分辨率为娜颂錚与其抑制剂三氟羧草醚的复合物晶体结构,为理解人体混合型卟啉症的发病机制和呋淼难芯刻峁┝酥匾5慕峁剐息。二、在结构和模拟计算支持的前提下,识别了在人体钚钥涨恢卸源呋程有重要作用的氨基酸残基,采用槐浞椒ń⒘嘶蛲槐涮逑担⒍云浠性进行测定,验证了这些氨基酸残基的重要性。三、对原卟啉原氧化酶的氧化机理进行了迸一步的研究,并且采用甪的方法测得了加速酶反应的速率常数,提出了碌拇呋趸啤四、通过高通量筛选对嘁种萍恋囊种贫ρЫ辛搜芯浚罢页隽嘶钚更高的化合物,在这些化合物结构的基础上,通过计算机模拟对不同官能团的影响进行总结,对高效新型抑制剂的研发具有指导意义。综上所述,本文从结构生物学的角度对人体原卟啉原氧化酶进行研究,所得到的实验结果对抑制剂的分子设计和卟啉症的研究具有指导作用。在此基础上结合计算化学对原卟啉原氧化酶与底物、抑制剂、辅助因子之间的相互作用进行了研硕士学位论文琍疨,’、、——,
⑨究。本文通过对抑制剂合理的分子设计和高通量筛选,为设计高效专一、开发新型抑制剂提供重要的理论指导和新思路。关键词:原卟啉原氧化酶;定点突变;动力学常数;氧化机理;停流技术;抑制剂硕士学位论文’
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