BNIP3在肝癌细胞抵抗失巢凋亡中的分子机制.pdf

原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者躲白1磊日期:2,0 .≥弓关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名:丝导师签名: 期:切pJ·2歹山东大学硕士学位论文目录 BNIP3在肝癌细胞抵抗失巢凋亡中的分子机制????????????????1 中文摘要????????????????????????????????.1 Molecular mechanism of BNIP3 conferring aoikis—resistance on hepatoma cells????9 Abstract????????????????????????????????????????????9 符号说明???????????????????????????????..16 前言?????????????????????????????????????????????17 第一章人BNIP3的真核表达载体币I]ShRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞自噬的影响???????????????????????????????21 第一节人BNIP3的真核表达载体的构建及验证?????????????.21 材料与方法???????????????????????????????21 1 材料??????????????????????????????????????????.21 质粒与菌株???????????????????????????21 细胞和细胞培养?????????????????????????22 生化试剂????????????????????????????22 一般试剂????????????????????????????23 主要实验仪器??????????????????????????24 2 方法??????????????????????????????????????????.24 、回收和纯化????????????..24 PCR扩增BNIP3编码区基因片段?????????????????..24 BNIP3编码区基因片段的大量扩增、回收和纯化??????????25 目的基因与载体的连接和重组子的转化???????????????26 、回收和纯化???????????????26 ?????????????????????26 ????????????????????????26 阳性重组子的筛选与鉴定?????????????????????26 ????????????????????26 山东大学硕士学位论文 ??????????????????????27 ?????????????.27 -????????????27 结果?????????????????????????????????????????????28 1 ????????????????????28 酶切筛选阳性重组子???????????????????????28 DNA自动测序与序列分析鉴定阳性重组子??????????????28 2 ?????????????????????28 -????.28 ?29 ,J、结????????????????????????????。:????????????????29 第