《死亡受体5与肝癌细胞凋亡的相关性》.pdf

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5．基础研究．。耽矗朱冉旭林菊生宋掌虎黎培员陶璐薇5(death珼是肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体，受体中的一员，属予舯瘤坏死因子家族。它广泛地高表达予许多翳瘤组织，而不表达或较少表达于正常的组织细胞中⋯。当肫渑涮錞相结合时，仅选择性堂望夔瘦嫠鲞鳗玺堡基慧旌鲞筮兰塑篓釜遮』壁垒盘：垒嬲祭蒹恚骸荩罕：兰【摘要】5(DR5)(TRAIL)(DRSmAb)肝癌细胞凋亡的影响。方法RT-PCRWesternblotHepG2朔正常人肝缨戆株腄在秘爨自水平的表达含量。应鼹霆警基偶氮躞盐法溺试缨胞的生长菇线，以观察谼对肝癌缓脆生长的稚裁作用，并雳流式细胞仪测定细胞的凋亡率。结果ttepG2SMMC7721DIL5L02DR5(P<005)TRAILTRAIL1000／时，翳瘗缨胞拣的增娥率就不再下降；薅翳癌继藏戆增殖率隧羲DRSmAb{1000稳赥处理的凋亡率在．％±ィ绦黾覶浓度，其凋亡率无显著改变；而同样剂量的处理保琀的凋亡率高达．％±ィ飨愿哂谇罢。同时发现，正常人L02TRAILPBS(P<005)YD1LSmAbL02DR5导肝癌细胞凋亡中起重要的作用；选择性地诱导肝癌细胞凋亡，对人正常肝细胞无诱导凋5DR5mAb【】Subject緿裕琀亡作用。，******@163net甅轕line(P<001)Withcondition(1474048)(P005)rhe雐基金顼爨：漤蘸粪塞然辩举蘩金炎臻矮篷作者单位：武汉，华中科技大学嗣济医学院辫属同济医通讯作者：林菊生，猰簂畁Ran-xuLINJushengSONG一，PeiyllnnTAO—甀College430030ChinaauthorLIN琲HepG2SMMCblotrespectivelyMTr甊産畉瓾．巍甿琀翼矗āDR5mAbAfter／瑃．％±ィ瑆．瓵畐hepatocytes．5DR5mAbCarcinomahepatocellularApoptosis院肝病研究所apoptosisinducing．瓸26l
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弓镂’．鶷陵矗一遗杀饬艘癯细胞竣转化细胞，焉对机体的正常组织DR5DR5TRAIL(agonisticDR5mAb)(HCC)材料与方法l|TRAIL公司，抗人固骞鹤悦拦鶵公司；购自上海生工生物公司；狹逆转录酶势静罚籇的鑭物盎上海生(HRP)记羊抗兔⒚庖哂〖；Х⒐馐约购自公落。赴嘌喝烁伟┫赴闔、L02DMEM10100Uml100Uml370C、饱和温度条件下培养。表达的检测：收集并按试HepG2SMMC7721L02mRNA2gmRNAMMLVcDNA(151)PCRDR55GCCTCATGGACAATGAGATAAAGGTGGCT-33Bactin5TACTCTCTC1CTGGCCTG-35GACAAGTCTDR58actinbp95594l嫱嘶餷min7245S30PCR15泳，与猘比较判断产物的相对表达强度。4DR5Western法检HepG2SMMC7721L02DR5Laemmli取这萦О镊咦灾省Ｈ縢总蛋自含量的裂解液进行％十二烷基硫酸钠一电泳，经硝酸纤维膜转移，含ネ阎谭鄣腡—缓冲液封闭后，泼牡デ俗髁σ豢梗℃孵育hHRP(ECL)Bactin为浅参照。甌和对细胞增殖的影响：将处1p196L(20040060080