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北京雷根生物技术有限公司


RIPA 裂解液(弱)
简介：
多种成分均可从细胞中提取总蛋白，如 Triton、SDS、NP-40 等。RIPA 裂解液(弱) (Weak
RIPA Lysis Buffer )是采用一种温和的裂解方法获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可用
于 PAGE 电泳、Western、免疫沉淀(Immunol Precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
Weak RIPA Lysis Buffer 主要由 Tris 、NP-40、sodium deoxycholate 等组成，并含有
多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。

组成：
编号
PS0011 Storage
名称
Weak RIPA Lysis Buffer 100ml -20℃
PMSF(100mM) -20℃
使用说明书 1 份

操作步骤(仅供参考)：
(一)贴壁培养细胞
1、 取 Weak RIPA Lysis Buffer 置于室温溶解混匀，使 PMSF 终浓度为 1mM。
2、 去除贴壁细胞的培养液，低速离心，弃上清。
3、 按照 6 孔板每孔加入 150～250μl 含有 PMSF 的裂解液的比例， 加入 Weak RIPA Lysis
Buffer。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或 4℃裂解，通常裂解
液作用于细胞 1～3s 内，细胞就会被裂解。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、 取 Weak RIPA Lysis Buffer 置室温溶解混匀后，使 PMSF 终浓度为 1mM。
2、 低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。
3、 用手指轻弹细胞，使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150～250μl 含有 PMSF 的裂
解液的比例，加入 Weak RIPA Lysis Buff