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大花蕙兰组织培养和快速繁殖方法
大花蕙兰采用传统的分株繁殖， 繁殖速度慢、 周期长，尤其对国外新引进的优良品种，难以迅速占领市场、 满足需求。大花蕙兰类组培快繁国内公开报道的仅限于虎头兰和‘水晶多芭’等个别品种，因其各种、品种间培养有很大差异，对于新品种‘西维亚’、‘玛利莲梦露’、‘蒙米拉丝’、‘女皇’的培养国内尚无
报道，对大花蕙兰的系统研究也远远跟不上市场的发展速度，我们于 1998 年以新引进的优良大花蕙兰品种为材料， 利用组织培养和快速繁殖技术， 开展了大规模工厂化育苗的系统研究， 提高了诱导成苗率和繁殖速度， 大大降低了成本， 使本项技术在市场中更具竞争能力和推广价值， 并繁育出大量种苗，批量供应市场，为大花蕙兰工厂化育苗提供了科学依据与参考。
把母株放在温室内盆栽培养， 于 2 月底～ 4 月初陆续从母株上取 8cm左右的新芽，从基部切离，用自来水冲洗，再用洗洁净溶液浸泡 5min，自来水冲洗 10min，剥去最外几层叶片， 并剪去芽的上半段。 然后在超净工作台上采用 3 步灭菌处理法处理 : 先在 70%的酒精中处理 6ｓ，立即投入 10%次氯酸钠溶液中 10min，稍加摇动，取出后用无菌水冲洗，剥去外层 2～3 片叶；再放入 5%的次氯酸钠溶液 5min，取出后无菌水冲洗，剥至最后一枚叶片；再放入 1%的次氯酸钠溶液 1min，取出后无菌水冲洗数次。以上次氯酸钠溶液中均加入 Tween-60 以利杀菌剂更有效地发挥作用。在无菌条件下剥出约 5mm长的茎尖，以生长点为中心， 用解剖刀把茎尖切成 4 个小方块，分别接入已准备好的培养基上。 pH ～ ，蔗糖 2%，琼脂条 %～%，温度 22～25℃，光照强度 2000Lx，每日光照 12h。
外植体接在附加一定激素配比的培养基上， 20d 左右外植体周围出现许多白色颗粒状愈伤组织，继续培养逐渐转为绿色， 25d 可形成大量原球茎，以后每隔 20d 进行一次继代培养， 若继代不及时易形成不定芽， 需在继代时切去， 影
响原球茎增殖，造成浪费。继代前观察统计试验结果。大花蕙兰对 KT的敏感程度高于对 6 BA的敏感程度，相同浓度的 NAA下， KT 用量稍微增减即会产生明显差异，低浓度的 KT对原球茎增殖有明显促进作用， 高于 则会抑制其生长。最佳激素配比为 ， / L。
随机分切法虽操作快捷，但有大量切割过于碎小的培养块死亡；纵切法
操作需细致、费时，但原球茎增殖数多，大小一致；碾压和井字型切割 ( 底部不分开 ) 原球茎增殖时间可缩短、可加快继代，但单个继代原球茎增殖倍数减少。
通过前期初步筛选后， 选择以附加 ，，把原球茎切块分别接种 MS，1 2MS，VW，KC为基本培养基的培养基上，测试不同培养基种类对原球茎增殖的影响。结果表明 :MS，1/ 2MS，VW， KC均可应用于原球茎增殖，但以 KC效果最佳。 MS，1 /2MS，VW也能分化和增殖原球茎，但增殖缓慢、色淡。附加香蕉泥对原球茎增殖有明显促进作用， 使增殖倍数提高到 ，且生长健壮，色泽深绿。
用固体培养基培养最差