全细胞生物催化制备生物柴油研究——固定化细胞的制备及其催化性能.pdf

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第卷第期林产化学与工业..
年月.
全细胞生物催化制备生物柴油研究
固定化细胞的制备及其催化性能
李治林,李迅,王飞,蒋剑春
.南京林业大学化学工程学院,江苏南京;.中国林业科学研究院
林产化学工业研究所;国家林业局林产化学工程重点开放性实验室,江苏南京
摘要: 以硅藻土、聚氨酯树脂、氧化铝和海藻酸钠种载体固定化米根霉细胞,探讨它们催化大
豆油甲酯化反应生产生物柴油的能力。结果表明聚氨酯树脂为适宜的固定载体,在液体发
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酵培养基中,,此时固定上细胞干质量
为.,培养液酶活为./。将此固定化细胞用于催化大豆油甲酯化反应,在甲醇:大豆油为:
甲醇分批加入每加入批的情况下,甲酯得率可达%。
关键词: 米根霉;固定化细胞;全细胞生物催化剂;甲酯化反应
中图分类号:; 文献标识码: 文章编号:———
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固定化细胞技术是世纪年代兴起的一种生物技术,它是指用物理或化学的手段将游离细胞
固定于限定的空间区域,并使固定后的细胞拥有良好的催化活性和重复使用性的一种方法⋯。这种以
固定化细胞来催化的化学反应又称全细胞催化,近年来在生物柴油的制备研究中有所应用,有望成为一
种新型、高效、无污染、低成本的生物柴油工业化生产方法。米根霉作为一种培养
简单、生长迅速、产酶能力强且对环境无毒的丝状真菌,在工业上有着广泛的用途。人们对米根霉细胞
固定化研究也较快,目前用到的固定载体有海藻酸钙、海藻酸钠、聚丙烯酰胺凝胶、聚氨酯泡沫树脂等,
主要是用于工业发酵产乳酸上。在适当的培养条件下,米根霉能分泌很高活力的脂肪酶包括胞外
收稿日期:——
基金项目:国家“”引进创新项目—一;江苏省研究生科研创新计划项目
作者简介:李治林一,男,重庆丰都人,博士生,从事生物质资源生物化学加工研究
通讯作者:王飞,教授,博士生导师,主要从事生物质能源与化学品、天然产物化学研究;:..。
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第期李治林,等:全细胞生物催化制备生物柴油研究——固定化细胞的制备及其催化性能
酶和胞内酶,这种脂肪酶优先水解。的饱和脂肪酸链,且具有,位置特异性,使得米根霉在油
脂行业有极好的应用前景。本研究在已经获得高产脂肪酶真菌米根霉的前提下,用不同的固定载体
固定米根霉细胞,并探讨了固定化细胞的活性及催化生产生物柴油的能力。
实验部分
. 原料
米根霉,为本实验室分离筛选保藏。海藻酸钠、硅藻土、聚氨酯树脂、大豆油福临门生产均为市
售;氧化铝、甲醇、氯化钙、氢氧化钠、硫酸、盐酸等均为分析纯。
. 主要仪器
一型高速离心机,美国;岛津一气相色谱仪,日本;—冷
冻干燥机,德板保种培养基:采用马铃薯培养基。灭菌后接种,在二恒温培养箱中培养。
液体摇瓶发酵培养基:胰蛋白胨% ,大豆油.% ,.%,.% ,
.% ,初始值.。在三角瓶中加人液体培养基,灭菌后接种,℃下/
摇床培养。
. 载体预处理
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