网织红细胞计数.doc

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网织红细胞计数
1．项目名称
网织红细胞计数
检验目的
2．1观察贫血疗效
2．2骨髓移植后监测骨髓造血恢复
2．3其他疾病协诊等 临床实验室
3．检验原理：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，甲蓝活体染色后，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
4．性能参数
4．1重复性
4．2分析和计算参数：百分比（%）
4．3样本量：染液量=1：1
4．4精密度
5．原始样品系统：
全血
6．容器和添加剂类型
7．试及显微镜
7．1 10G/L新亚甲蓝（或煌焦油蓝）生理盐水溶液：
新亚甲蓝
枸橼酸钠
氯化钠
溶于双蒸馏水100ML中，混匀，过滤后备用。
7．2 显微镜
7．2．1 商标
8．校准程序:显微镜的验证，光路系统校正
灯泡大约半年更换一次
9．程序步骤：
9．1标本采集与要求
9．1．1标本采集：
，加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝真空试管中，并轻轻颠倒10次使之充分混匀，不得有凝块、不得形成泡沫，±，并在试管上做好标识。采血应避免溶血，采血后2小时内送到检验科，需要运输时应在低温条件下运输。采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤。
9．1．2不合格标本的处理
对凝固、有凝块、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理
9．1．3标本保存
检测应在标本采集后2小时内完成,2～8℃保存不超过4小时,分析后的标本保存三天。
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9．2检验前准备
9．2．1把接收到的标本按顺序编写序号。
9．2．2准备清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管，玻璃笔。
9．3病人标本的检验
9．3．1取小试管1支加10G/L新亚甲蓝盐水溶液2滴。
9．3．2加入末梢血（或EDTA钾抗凝静脉血）2滴于上述试管中，混匀。
9．3．3室温下放置10~15MIN后，取1滴制成薄片。
9．3．4油镜下至少计数1000个红细胞中网织红细胞数。
9．3．5计算 网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000
网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分比数*红细胞数/L
【注意】
活体染色时间不能过短。室温低时，放37摄氏度恒温箱。
最好制两张片，每张计数1000个红细胞，避免分布不均引起的误差。涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。
为计数方便，可于目镜中放一中间有孔硬纸，缩小视野便于计数。
试剂应定期重配，以免变质沉淀。
染液与血液比例约为1：1，严重贫血时可适量增加血液的比例。
10．质量控制
10．1显微镜法 网织红细胞目视激计数误差较大，影响因素主要有：操作人对网织红细胞认识不同；血涂片的好坏；计数红细胞数量的多少和计数方法等。
10．2仪器法 岁可计数红细胞10000~50000个，但如存在Howell-Jol