基础微生物实验板书资料.ppt

基础微生物实验板书资料
1．实验目的与要求
（1）了解普通光学显微镜的构造 、学会显微镜使用和维护方法；
（2）掌握细菌涂片技术、革兰染色方法及其原理；
（3）熟悉细菌基本形态。
基础微生物实验板书资料
（一）普通光学显微镜的构造  分光学和机械两大部分。光学部分包括接目镜、接物镜、集光器、光源等；机械部分有镜筒、镜臂、镜座、旋转器、载物台、光圈、倾斜关节、调节螺旋、次台等。
基础微生物实验板书资料
（二）油镜使用的基本原理
油镜头的晶片细小，进入镜中的光亮亦较少，其视野较用高倍镜时暗。当油镜和标本间介质为空气时，因空气与玻璃的折射率不同，会有一部分光线被折射而不能进入油镜内，使视野更暗，若在镜头与标本之间放上与玻璃的折射率相同的油类，如香柏油等，则光线不发生折射，从而增加视野的照明度。
基础微生物实验板书资料
（三）显微镜的使用方法
 
2、低倍镜观察 
3、高倍镜观察 
4、油镜观察 
5、用低倍镜和高倍镜观察酵母标本片，油镜观察球菌、杆菌、螺旋菌的染色标本片。
基础微生物实验板书资料
（四）简单染色法与革兰氏染色法
（1）观察细菌的基本步骤：先用低倍镜再用高倍镜
（2）革兰氏染色法操作：
涂片 →干燥 →固定 →草酸铵结晶紫出染（1min）→水洗 →碘液媒染（1min）→水洗 →95%乙醇脱色（30s）→水洗 →沙黄复染（1min）→水洗 →滤纸吸干 →油镜检查
4．注意事项
（1）细菌制片时不宜涂厚。
（2）严格保证脱色和染色时间。
（3）使用显微镜注意保护镜头。
基础微生物实验板书资料
思考题
1、绘出你所观察到的细菌形态图。
2、观察细菌时为何使用油镜？它与普通物镜在使用方法上有何不同？
3、光学显微镜的目镜与物镜的常用放大倍数？显微镜的放大倍数越高，分辨力越高吗？为什么?举例说明。
1、绘出你所做的革兰氏染色制片中细菌的形态图，并标明总放大倍数及染色反应结果。
2、详叙革兰氏染色的原理及操作方法，染色时应注意哪些问题？
基础微生物实验板书资料
实验二 培养基的制备
基础微生物实验板书资料
1．实验目的与要求
（1）掌握一般培养制备原理及原则，并学会配制一般普通培养基操作过程；
（2）学习微生物实验室常用灭菌设备的使用方法；
（3）学习玻璃器皿的包扎方法。
2．实验内容提要
（1）液体培养基的制备
（2）固体培养基的制备
（3）微生物实验室常用灭菌设备的使用方法和灭菌方法
（4）玻璃器皿的包扎方法
（5）棉塞的制作方法
基础微生物实验板书资料
3．实验操作要点
1配料 → 温水溶解 → 校正pH值 → 煮沸 → 加琼脂融化 → 过滤 →分装 →加盖棉塞 →包扎 →灭菌 →无菌检查（液体培养基的制备时不加琼脂）
2微生物实验室常用灭菌设备的使用
（一）   手提式高压蒸汽灭菌器 
（二）   干热灭菌箱
（三）紫外线灭菌室
基础微生物实验板书资料