BioRad色谱柱说明书
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胺基树脂柱使用维护指南手册
目 录
1树脂色谱柱的介绍
2柱子结构
2。1拆箱
2.2 清洗液的制备
3 柱子的保护
清洗指南
4 固定相
5 操作参数
5。1 流速
5。2 样品分离
5。3 压力控制
5。4 测试
6 再生步骤
6。3 柱子恢复到原始离子状态
6.4
6.5仪器调整/ 连接管道问题
7 加热柱关闭
8柱子保存
8。1 长期保存
8。2 短期保存
9 故障检修
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第一部分:
树脂基HPLC(高效液相色谱)色谱柱介绍
树脂基HPLC色谱柱依据离子排斥、离子交换、配体交换、粒度排斥、反相和正相分配原理。多重模式和交互作用提供了分离物质的独特的能力。树脂的装填使柱子有离子交换的能力。。
要达到有效分离,反相和离子对HPLC技术要求复合洗脱剂条件。这些方法建立在待分析化合物的改性上,直到对柱子适合为止。对于树脂基的HPLC柱,,树脂基柱也可用于异构体的HPLC体系,简化样品的制备方法,同时要求样品没有衍生作用。通过缩短样品的制备时间,树脂基柱大大缩短了总的分析时间,但是对于大部分的分离,样品制备时必须进行过滤。
柱子是高效液相色谱的核心。分析的成功与否取决于合适的操作条件选择及柱子的维护保养,不管HPLC系统及样品的制备多么好,如果柱子的使用不当,也得不到好的分离结果。
第二部分:色谱柱结构
拆包取色谱柱时,仔细检查是否有运输过程中的损害,粗处理或者溶剂泄漏。使用运输过程中的箱子存放柱子。如果发现柱子被损坏的迹象,立即通知运输方,并且联系Bio-Rad公司技术服务部或直接去Bio—Rad公司在当地的办事处。
2.2 准备洗脱液(也就是流动相)
只有新的去离子水、分析纯试剂和高纯度有机溶剂可以用来制备洗脱液。制备好的流动相在使用之前需用0.45μm的过滤器进行过滤以除去可以堵塞系统进口的不溶性微粒。而基线不稳常常是由于流动相不干净引起的。使用前对洗脱液进行充分的脱气处理。
使用真空和超声处理是对流动相进行脱气的最好的方法。仅使用真空脱气也可以,但需要的时间较长。在真空瓶内装有搅拌棒对于溶剂中气体的脱除很有帮助。单纯的过滤并不能除去所有的气体。
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。更换水溶液和有机溶剂过程中进行也可能引起除气。操作前一定要确定两种溶剂均进行了充分的脱气处理。
第3部分
保护柱
对色谱柱的保护成为公认的HPLC技术的一部分已经有很多年了,—Guard 室不但可以延长分析柱的寿命,还可以保护柱内的样品。影响分离、污染分析柱的的污染物可以在预柱中除去。
由于阴离子、阳离子、有机物、-Rad公司强烈建议使用预柱。
高效液相色谱柱保护系统包括可处理的安装在标准保护架上的保护室,或者双重的去灰支架的阴离子或阳离子小室。去灰支架在HPX-42A银铵基柱上使用。去灰形式可以在其他使用水为流动相的柱子上使用.
保护柱必须在污染物扩展到分析柱上之前更换。更换频率并没有规定,因为这依赖于样品制备条件。一般的,。
安装保护柱管,拧松支架末端的螺母。使用Parker式 小室开始使用时可以在任何一个方向使用,改变用过的小室的方向可能导致微粒从小室中流出污染分析柱。小室支架到HPLC柱之间连接一断管前移量(参见小室支架介绍).将保护柱安装到固定支架上,使用两末端螺母紧固确保固定支架的指状梁紧固。额外的紧固是不需要的,这还有可能破坏焊封或支架。不要使用其他仪器紧固焊封。
3。2 吹洗保护柱
使用10~15ml流动相以0.2~,对于树脂基色谱柱,在开始的一小段时间内,柱末端流出黄色的液体是正常的。这是储存柱子时形成的磺
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