分子互作
熊 玉 翠
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生物分子互作技术(Biomolecular Interaction Analysis)是基于SPR (Surface Plasmon Resonance)原理的新型生物传感分析技术。传统的检测生物分子间相互作用的探针分子和目标分子亲和常数的方法如平衡透析法、光谱测量法、热量测定法、脱氧核糖核酸酶足迹法等,大多需要荧光标记或放射性标记。本文将介绍一种应用SPR(Surface Plasmon Resonance)原理检测生物传感芯片(biosensor chip)上配位体与分析物作用的一种新技术。
概 述
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精品资料
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你怎么称呼老师?
如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进?
你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式?
教师的教鞭
“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
“太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
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SPR是在不需使用荧光或同位素标记甚至无须纯化各种生物组分的天然条件下,通过传感器芯片实时监测各类生物分子如多肽、蛋白质、寡核苷酸、寡聚糖、脂类甚至全病毒、细胞之间相互作用的整个过程,并通过分析软件获取生物分子结合/解离、亲和性/特异性、协同/拮抗、反应速率/浓度变化等互作动力学参数。
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SPR生物传感器的基本结构
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Krestschmann棱镜型
金属膜
反射率高
化学稳定性好
50-100nm
金属膜直接吸附法
共价连接法(生物素-亲和素、葡聚糖凝胶、水凝胶、高分子膜、多肽等)
单分子复合膜法
分子印膜技术
分子敏感膜
Sensor chip
金属膜
分子敏感膜
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分子互作
SPR是一种物理光学现象。在发生全反射的界面涂上一薄层金膜(或其它金属膜),由于金膜中有自由电子,它们并不是静止不动而是不停在平衡位置附近振动,并具有一定的频率。当光由另一侧以大于临界角入射到金膜的界面,由于入射光会在界面方向有一分量,当这一分量与金膜中电子振荡频率相同时,二者将发生共振,界面处的全反射条件将被破坏, 呈现衰减全反射现象,入射光被金属表面电子吸收,使反射光能量急剧下降
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当入射光波长固定时,反射光强度是入射角的函数,其中反射光强度最低时所对应的入射角称为共振角(SPR angle)
分子互作
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分子互作
SPR对附着在金属薄膜表面的介质折射率非常敏感,当表面介质的属性改变或者附着量改变时,共振角将不同。因此,SPR谱(共振角的变化vs时间)能够反映与金属膜表面接触的体系的变化。
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