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基因工程第二章载体
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第二章 基因克隆的载体
引 言（introduction）
第一节 质粒载体（plasmid vectors）
第二节 噬菌体载体（phage vectors）
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质粒载体的生物学特征
（1）质粒是一种广泛存在于细菌细胞中染色体以外的能自主的
复制的裸露的环状双链DNA分子，比病毒更简单。在霉菌、蓝藻、
酵母和一些动植物细胞中也发现了质粒，目前对细菌的质粒研究得
比较深入，特别是大肠杆菌的质粒。
（2）质粒的大小差异很大，最小的只有1kb,只能编码中等大
小的2-3种蛋白质分子，最大的达到200kb。质粒的拷贝数多则50，
少则只有一个。
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（3）质粒的不亲和性，两种亲缘关系密切的不同质粒不能在同一宿主细胞中稳定共存，属于同一个不亲和群，如pMB1或ColE1的派生质粒。已鉴别出25个以上大肠杆菌质粒的不亲和群，它们是不相容群体的。
（4）质粒的分类
F质粒，或叫致育质粒，仅携带转移基因，特征：促进质粒间的有性结合。
R质粒，或叫耐药性质粒，能赋予宿主细胞耐药性，特征：耐药性。
Ti质粒,根瘤农杆菌中的毒性质粒，赋予宿主细胞致病性。

Col 质粒，
降解质粒，
质粒载体的生物学特征
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（5）质粒的存在形式 有超螺旋、开环双螺旋和线状双螺旋三种。在琼脂糖凝胶电泳中，不同构型的同一种质粒DNA，尽管分子量相同，仍具有不同的电泳迁移率。其中走在最前面的是SC DNA，其后依次是L DNA和OC DNA。
双螺旋共价闭合环（超螺旋SC构型）
开环双螺旋（一个裂口， OC构型）
线状双螺旋（两个裂口，L构型）
质粒载体的生物学特征
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（1）pUC
是在pBR322基础上发展起来的克隆载体。 kb，带有复制起始位点，ampicillin 抗性基因和lacZ 基因。
常用质粒载体介绍
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（2）pGEM-3Z 带有 LacZ 基因， kb ，
氨苄青霉素抗性基因，高拷贝。
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（3）pBluescript SK pBluescript SK 同 pGEM 类
似，另外还带有线状噬菌体f1 的复制起始位点。 可以产
生单链DNA。
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第二章 基因克隆的载体
引 言（introduction）
第一节 质粒载体（plasimid vectors）
第二节 噬菌体载体（phage vectors）
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第二节 噬菌体载体
一、噬菌体
1 噬菌体的生物学特征
2 噬菌体的侵染
3 噬菌体的DNA分子
二、M13噬菌体
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