白细胞计数实验报告.doc

白细胞计数实验报告
白细胞计数和分类
目的：掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、
原理：各种白细胞必须经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏（Wright’s）染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值，以观察其数量、形态和质量变化，通过显微镜观察染色血涂片，计算血液中各类白细胞的百分率，称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率，即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。
实验器材： 香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、~、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片
实验步骤
白细胞分类
1．血片制作：
取一滴血，滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片，右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方，然后向后拉，当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致，用力应均匀，即推出均匀的血膜（血膜不可过厚、过薄）。将制好的血涂片晾干，不可加热。
注：（1）良好涂片标准：
１) 呈头、体、尾舌形
２) 血膜厚薄适宜
３) 两边留有空隙
（2）涂片好坏与下列因素有关：
1）血滴大小
2）推片与玻片之间角度
3）推片速度
2、血涂片的染色步骤：
（1）用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于染色架上。
（2）滴加瑞氏染液，共计七八滴数，以盖满血膜为度，静置1分钟。
（3）再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液，轻轻摇动，并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀，静置15分钟。
（4）用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗，否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥，即可镜检。
3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然