田基黄色谱指纹图谱及其不同部位药效学的研究.pdf

中山大学2005届博士学位论文田基黄色谱指纹图谱及其不同部位的药教学研究杨立伟0217001010 田基黄色谱指纹图谱及其不同部位的药效学研究专业名称: 植物学博士生: 杨立伟指导老师: 施苏华教授苏薇薇教授中文摘要田基黄原名地耳草,为藤黄科金丝桃属植物Hypercum japonicum ,在我国南方多个省份均有分布。田基黄次生代谢产物丰富,主要含有黄酮类化合物(flavonoids)、瑚m瑚类化合物及香豆素类(counmrins)等化合物, 常用于治疗急、慢性肝炎、胃肠道失调和肿瘤等疾病。其制剂田基黄注射液用于临床治疗肝炎已有数十年的历史,临床验证疗效确切。目前田基黄用药沿用韵仍是77版中国药典收载田基黄质量标准,但是,该标准的技术含量明显偏低且专属性不强,这显然不符合当今中药材的使用管理要求。随着当今社会用药水平的不断提高,药物分析技术的迅猛发展,能有效控制中药内在质量的色谱指纹图谱被提上日程。国家药监局已经明确规定所有的中药注射剂及其原料药材必须建立以色谱指纹图谱控制的质量标准,本研究就是在这样的背景下展开的。本文采用正交设计方法对样品制各方法进行了筛选并对液相色谱条件进行了系统优化,所得HPLC指纹谱图不但分离效果好而且信息量大,适合田基黄药中山大学2005届博士学位论文田基黄色谱指纹图谱及其不同部位的药效学研究杨市伟0217001010 材的质量控制。利用建立的H-PLC指纹图谱对不同来源的田基黄药材(56批) 进行了分析,同时考察了田基黄药材的采收期、产地、采集年份及储藏期等因素对药材质量的影响并制订了田基黄药材的投料标准:在田基黄药材HPLC指纹图谱的基础上,建立了田基黄注射液的HPLC指纹图谱。并利用所建立的指纹图谱考察了田基黄注射液的生产工艺,发现了生产过程中的三个不稳定步骤。实践证明该研究为田基黄注射液生产工艺的改进提供了科学依据。在指纹图谱研究的基础上,利用柱色谱分离法将田基黄中的主要成分进行了分离,得到了两个含有不同类成分的部位。l4)、(D—GaIN)及a一萘异硫氰酸酯(n-ANIT)三种化学肝损伤模型对田基黄提取物及不同分离部位进行了保肝降酶、利湿退黄作用研究,证明田基黄保肝降酶、利湿退黄作用的物质基础是其整体成分,任一部位的疗效均不能代表整体。研究初步确立了田基黄不同部位的药效关系之间的关系。本研究的完成为田基黄及其注射液的质量标准提高提供了完善的高效液相色谱指纹图谱方法;为田基黄的临床应用和进一步开发提供了科学地依据;为中药指纹图谱及其谱效关系的研究和探索提供了新方法和思路。关键词:田基黄质量控制指纹图谱肝损伤药效作用中山大学2005届博士学位论文田基黄色谱指纹图谱及其不同部位的药效学研究杨立伟0217001010 Study ontheChromatographic Fingerprint and Pharmacological Efficacy ofTianjihuang Abstract Hypericum japonicum thunb.(Tianjihuang)is aChinese herbalmedicine used forthetreatment ofbacterialdiseases,infectious hepatitis,gastrointestinal disorder, internalhaemorrhage and herb grows wildly inthewal'nland humid southern is a prolific producer of secondary metablites such as phloroglucinol derivatives,flavonoids(including quercitrin,isoquemitrin and taxifolin-7-0一rhamnoside,et a1),lactones,xanthonoids,chromone glycosides and ofthese constituents ale known to exhibit pharmacological and biological ,quercitrin andisoquercitrin showed anticoagulation of activated partial thromboplastin timereagent㈣m and taxifolin-7-O- rhamnoside showed promoting coagulation plicate