FolinWu法定量测定血糖的含量(精).doc

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Folin-Wu法定量测定血糖的含量(精)
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Folin-Wu法定量测定血糖的含量(精)
血糖含量的定量测定 (Folin-Wu 法
一、目的
1、掌握 Folin － Wu法测定血糖含量的原理和方法。
2、学会制备无蛋白血滤液。
3、掌握 7200 型可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理
葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。其醛基具有还原性，与碱性铜试剂混合加热，
葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基， ，Cu2+即被葡萄糖还原成 Cu+（Cu2O）而沉淀。
无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应 , Cu2O 又把酸性钼酸试剂
（ Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物—钼蓝 。
血滤液中葡萄糖的含量与产生的 Cu2O成正比，而 Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。
3、实验仪器
1、25mL血糖管 ×3 支；
2、血糖管橡胶塞 ×3 个；
3、1mL胖肚吸管 ×1 支；
4、100mL锥形瓶 ×2 个；
5、漏斗架 ×1 个；
6、普通漏斗 ×2 个；
7、水浴锅 ×1 个；
8、电炉 ×1 个；
9、移液管 1mL×2 支; 2mL ×3 支;5 mL ×2 支;
10 mL×1 支 ; 10 、滤纸 ×1 盒；
11、吸耳球 ×2 个；
12、7200 型分光光度计 ×1 台 ;
13、表面皿 ×1 个
4、实验试剂
1、标准葡萄糖溶液（ ）
(11%葡萄糖母液：称取 葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至 100ml。
(2 葡萄糖标准液：取 葡萄糖母液于 100ml 容量瓶中，加蒸馏水定容。
2、碱性硫酸铜溶液
A 液：无水碳酸钠 35g，酒石酸钠 13g 及碳酸氢钠 11g 溶于蒸馏水，稀释定容至
1000ml.
B 液：硫酸铜晶体 5g，溶于蒸馏水并定容至 100ml。
临用时， A 液： B 液=9：1 混合（体积比），混合液于冰箱中保存（ 4℃）。
3、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠 10g，溶于蒸馏水并定容至 100 毫升。
4、 溶液：于 53ml 蒸馏水中加入 1ml 的浓硫酸。
5、酸性钼酸盐溶液：
称取钼酸钠 600g, 用少量蒸馏水溶解后倾入 2000ml 的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水 ，摇匀，静止数小时后取上清
夜 500ml，于 1000ml 容量瓶中，徐徐加入 225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加 25%
硫酸 150ml。
置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加 99%醋酸 75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至 1000ml, 贮于棕色瓶中。
5、实验步骤
1、无蛋白血滤液的制备