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肺结核性及腺癌性胸水SDS PAGE蛋白图谱分析
【摘要】目的分析肺结核性及腺癌性胸水SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE )图像之图谱特点及异同,为两者的鉴别诊断奠定基
【摘要】 目的分析肺结核性及腺癌性胸水 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS
PAGE )图像之图谱特点及异同,为两者的鉴别诊断奠定基础。方法 选用28
例肺结核性胸水及36例肺腺癌性胸水,每例均以5%&缩胶和不同浓度(6% 8% 10% 12% 15%之分离胶行SDS PAGE分离胸水中蛋白质,考马斯亮蓝 染色,AlphaEaseFC Stand Alone图像分析软件分析10%分离胶凝胶图像。结果 不同浓度(6% 8% 10% 12% 15% 的分离胶SDS PAGES像表明,肺结核 性胸水及肺腺癌性胸水经10%SDS PAGE分离,两者的胸水蛋白在40〜200 kD 范围内均可稳定分离得到10条蛋白条带。这些条带蛋白质分子量分别为 200 kD、152 kD、134 kD、118 kD、103 kD、98 kD、84 kD、62 kD、54 kD、43 kD。含量达60%^上的蛋白质分子量在 54 kD至84 kD之间。50〜60 kD区间的 蛋白质含量肺结核性胸水高于肺腺癌性胸水,差异具有显著性。结论 10%及
12%勺分离胶对胸水中的蛋白具有较好的分离效果;经 10%勺分离胶分离,肺结
核性胸水分子量在50〜60 kD区间内的蛋白含量高于肺腺癌性胸水,具有鉴别 诊断价值。
【关键词】 SDS PAGES白 肺癌 肺结核 胸水 图像分析
肺结核及肺腺癌是临床上引起胸水的两种常见疾病]1-5 ]。目前,有近20%勺 结核性和癌性胸水在临床经全面检查后仍难以鉴别]6],因而影响疾病的治 疗。由于结核性和癌性胸腔积液的治疗及预后有很大的差别,因此两者的鉴别 至关重要。胸水蛋白SDS PAGE®谱的图像分析尚未见报道。为探讨肺结核性 及腺癌性胸水SDS PAGE5白图谱分析的诊鉴价值,笔者进行了研究。
1 材料与方法
研究对象
收集南方医院2007年7月至2008年7月的肺结核性胸水28例及肺腺癌性 胸水36例。其中男性33例,女性31例,平均年龄( ± )岁。每例 均经细胞病理学、组织病理学或结合临床资料确诊。所有胸水标本离体后,立 即4C4 000 r/min ,离心10 min ;取上清,分装后-20 C冻存。
SDS PAG礙胶电泳
制备6% 8% 10% 12/及15%勺分离胶和5%&缩胶。取3卩L胸水与3 卩L 2 x SDSt样缓冲液混匀,煮沸3 min,离心后上样电泳。设置电压分离胶 90 V 30 min,浓缩胶120 V 3 h至溴酚蓝指示剂达凝胶底部时终止电泳,参照 文献[7-9 ]行凝胶染色与脱色。
染色后的凝胶经凝胶成像系统 CCD摄相取图,用AlphaEaseFC Stand
Alone软件行凝胶图像分析,并参照文献[10-11 ]用图像分析方法定量分析蛋 白质含量。
统计学处理
,计
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