知识回顾
基因工程的实质是什么?
将一种生物的 转移到另一种生物体内,
后者可以产生它本来不能产生的 ,进
而表现出新的 。
思考:
基因工程产生的蛋白质是否完全
符合人类生产和生活的需要?
基因
蛋白质
性状
一、蛋白质工程崛起的缘由
1、基因工程的局限性:
a、在原则上只能生产自然界已存在的 。
b、天然蛋白质的不足
天然蛋白质是生物在长期 过程中形成的,它们的 符合特定物种 的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
2、蛋白质工程的目的:
生产符合人类生产和生活的需要并非自然界已存在的
。
蛋白质
进化
结构和功能
生存
蛋白质
例如:
改造
干扰素(半胱氨酸)
体外很难保存
干扰素(丝氨酸)
体外可以保存半年
玉米中赖氨酸含量比较低
天冬氨酸激酶
(352位的苏氨酸)
二氢吡啶二羧酸合成酶(104位的天冬酰胺)
改造
改造
天冬氨酸激酶
(异亮氨酸)
二氢吡啶二羧酸合成酶(异亮氨酸)
玉米中赖氨酸含量可提高数倍
二、蛋白质工程的基本原理
1
蛋白质工程的概念
2
前提:
原理:
目的:
了解蛋白质的结构和功能
改造基因(基因修饰或基因合成)
定向改造或制造蛋白质
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
对天然蛋白质进行改造,你认为直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现?
:
是对编码蛋白质的基因进行改造
蛋白质工程流程图:
蛋白质
三维结构
氨基酸序列
多肽链
基因
DNA
预期功能
DNA合成
分子设计
mRNA
生物功能
转录
翻译
折叠
从预期的蛋白质功能出发
设计预期的蛋白质结构
推测应有的氨基酸序列
找到相应的脱氧核苷酸序列
天然蛋白质的合成途径:
二、蛋白质工程的基本原理
对照P27蛋白质工程流程图,说出主要步骤。
蛋白质工程的主要步骤通常包括:
(1)从生物体中分离纯化目的蛋白;
(2)测定其氨基酸序列;
(3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白质的二维结构和三维晶体结构;
(4)设计各种处理条件,了解蛋白质的结构变化,包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响;
(5)设计编码该蛋白的基因改造方案,如点突变;
(6)分离、纯化新蛋白,功能检测后投入实际使用。
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