微生物实验微生物数量和大小测定课件.ppt

微生物实验微生物数量和大小测定
学习使用镜台测微尺和目镜测微尺; 在显微镜下测定微生物大小。
试验(一) 微生物大小 测定
一、目 要求
二、试验原理
镜台测微尺是中央部分刻有正确等分线 载玻片, 通常是l mm等分为100格, mm(即10 um) , 用于校正目镜测微尺每格 相对长度。
目镜测微尺是一块可放入接目镜内 圆形小玻片, 其中央有正确 等分刻度。目镜测微尺每小格所代表 实际长度不一样, 需将其放在接目镜中 隔板上, 测量前, 必需先用镜台测微尺进行校正。
目镜测微尺
镜台测微尺
每格绝对值
（um）＝两重合线间镜台测微尺格数×10/两重合线间目镜测微尺格数

三、试验器材
1、菌种:
酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae ）
2、器材:
显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺
三、试验步骤
1、目镜测微尺 校正
镜台测微尺有刻度 一面朝上, 置显微镜载物台上, 先用低倍镜观察, 将镜台测微尺有刻度 部分移至视野中央．转动目镜使目镜测微尺 刻度与镜台测微尺 刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺, 使两尺在某一区域内两线完全重合, 分别数出两重合线之间镜台微尺和目镜微尺所占 格数。先10x, 后40x, 分别计算10x ,40x下目镜测微尺 校正值。
2、细胞大小 测量
酵母菌悬液滴在载玻片上, 盖上盖玻片, 置显微镜载物台上。用目镜测微尺测量细胞宽和长。
三、试验结果
（物10×和40×）,选择5-8个酵母菌, 测定其40×大小范围。
四、思索题 p51 2(2)
1、明确血细胞计数板计数 原理。
2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数 方法。
试验(二) 微生物数量 测定
一、目 要求
显微镜直接计数法是将小量待测样品 悬浮液置于一个尤其 含有确定面积和容积 载玻片上(又称计菌器), 于显微镜下直接计数 一个方法。用于细胞总数 测定
显微镜直接计数法 优点是直观、快速。缺点是所测得 结果通常是死菌体和活菌体 总和。现在已经有部分方法能够克服这一缺点, 如结合活菌染色, 微室培养等方法来达成只计数活菌体 目 。
二、试验原理
血细胞计数板由两条槽组成三个平台; 中间较宽 平台又被一短横槽隔成两半, 每一边 平台上各刻有一个方格网, 每个方格网共分为八个大方格, 中间 大方格即为计数室。计数室是由一个大方格分成25个中方格, 而每个中方格又分成16个小方格; 累计400个小方格。
计数时, 通常数五个中方格 总菌数, 然后求得每个中方格 平均值, 以及大方格中 总菌数, 再换算成1 ml菌液中 总菌数。