遗传学实验-果蝇唾腺染色体.ppt

遗传学实验二果蝇唾腺染色体的制备与观察一、实验目的?; ?; ?。二、实验原理?双翅类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大,其中的染色体称为唾腺染色体(salivary chromosome) ; ?这种染色体比普通染色体大得多,宽约 5μ m,长约 400 μm,相当于普通染色体的 100- 150 倍,因而又称为巨大染色体; ?唾腺染色体经过多次复制而并不分开,大约有 1000-4000 根染色体丝的拷贝,所以又称多线染色体( polytene chromosome) ; ?唾腺细胞中同源染色体互相靠拢呈现联会状态- 体联会; ?各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心( chromocenter ); ?唾腺染色体经染色后,出现深浅不同、密疏各别的横纹(band) ,其数目和位置是恒定的, 代表着种的特征; ?如果染色体有缺失、重复、倒位、易位等畸变,很容易在唾腺染色体上识别出来,因此唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料。三、实验材料?黑腹果蝇的三龄幼虫为了得到更好的染色体标本,需要在20—25℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓、肥大,爬上管壁的三龄幼虫(化蛹之前)做标本最佳。三龄幼虫照片四、实验仪器与试剂 1. 器具: 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。 2. 试剂: 改良苯酚品红溶液、生理盐水、 1N 盐酸。五、实验步骤?实验前知识准备: 果蝇三龄幼虫的唾腺位于幼虫的头部附近, 可以看看显微照片中的位置(点击图片观察放大图) ?实验开始 。载玻片上滴加生理盐水 1-2 滴,取三龄幼虫放在其中, 操作者两手各握一枚解剖针,左手的解剖针压住幼虫后端 1/3 处,固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头部,用力向右拉,把头部从身体拉开,唾腺随之而出,唾腺是一对透明的棒状腺体。用针剔除脂肪组织。图示 : 在载玻片上除去幼虫其它部分,用吸水纸吸去生理盐水,然后在腺体上加 1-2 滴 1NHCl 溶液,作用 5-10 min 。 : 用吸水纸吸去 HCl ,滴加蒸馏水于腺体上进行冲洗(两次)。 : 吸去蒸馏水,加 1-2 滴苯酚品红溶液, 染色 10min 。 5. 压片观察:用镊子加盖玻片,压片。镜检。六、实验结果 ,找到好的染色体图像后, 放到视野中心,再用高倍镜观察。 2. 黑腹果蝇染色体是 2n=2 × 4=8 (图一),但由于体细胞配对,又因短小的第 4染色体和 X染色体的着丝粒在端部,所以染色体的一端在染色中心上,看上去,各自只形成一条线状和点状染色体。只有第 2和第 3染色体的着丝粒在中央,它们从染色中心以 V字形向外伸出( 2L , 2R ,3L ,3R ), 因此共有 6条(图二)。