苹果组织培养.doc

苹果组织培养研究进展摘要: 苹果组织培养技术研究取得了较大的突破, 本文从苹果组培的几个方面入手, 从器官、组织、原生质体及再生体系的建立等综述其研究进展。关键词: 组培;再生;诱导苹果为多年生木本植物,在遗传上都是杂合体,由于对控制性状的基因了解较少,使得通过常规杂交育种来培育新品种有一定困难,特别是改良现有品种的某一两个不良性状更显棘手。本世纪 50~60年代开展的植物组织培养技术和 70年代后期在植物分子生物学和组织培养基础上发展起来的植物基因工程,为解决这些困难开辟了新的途径[1]。1离体微繁及其应用 离体繁殖的应用用组织培养的方法加速繁殖新引或培育的品种,可不受季节的限制和影响,可以很容易将一些病原脱除,获得无病毒植株。传统苹果都采用田间种植来保存种质,占地面积大,管理成本高,并容易受炭虫危害,引种或种质交换过程容易携带病虫原,采用组织培养物作为保存物,不仅节省土地、管理方便、也便于国内外种质交流,通过组培技术能够从体细胞和组织再生完整植株。苹果诱变选种多年来一直存在嵌合体现象,利用苹果体细胞胚技术进行突变体选择,将会使突变育种效率提高,同时体细胞胚技术也为研制苹果人工种子奠定了基础。 . 苹果直接器官发生型 芽茎段、芽体这两种外植体其上已有芽或胚芽的分化,培养就是使其已分化的芽萌发,长出新梢, 其中用茎段培养方法进行苹果优良品种和砧木大规模繁殖已成为常规方法。白桦等(1998 )使用苹果“丽红”嫩梢茎段, 6月中旬取正在生长的嫩梢,自来水冲洗干净, 切成带腋芽的茎段,70% 酒精浸 10秒钟,%HgCl 2溶液消毒 10分钟,无菌水冲洗 5次, 接种时将茎段接触消毒液的切口部分切掉,外植体长约 1cm 左右,接种于 MS附加 培养基上,取得了良好的效果[2],也证明了培养基中添加 BA对腋芽萌发的重要性。张巨祥等(1986 )在秋天红富士苹果采摘之后,选取健壮无病成年树徒长枝条,埋于地下,冷藏越冬。第二年春天,取出枝条,在温室进行催芽。待芽萌动后,用自来水将枝条冲洗千净,切成带有 1~2个节的切段,在95% 酒精中浸泡 1分钟,再用 % 氯化汞液浸泡 10分钟,最后用无菌水冲洗 4~5次,按常规无菌操作方法,当培养基中 IAA 浓度为 时, 6-BA 浓度以 2mg/L 为最好, 300mg/L 有利于苗的正常生长,并可防止玻璃苗的产生[10]。 茎尖培养茎尖培养时是先从茎尖长出小芽,再从芽的叶腋内已有芽原基上长出小芽,腋芽不断形成、不断萌发,从而形成丛生苗,属芽分化的器官型再生方式[4]。茎尖培养是大量繁殖苹果苗木及培育无病毒植株的一个重要途径,根据茎尖培养的目的和取材大小可分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型[5]。一般茎尖分生组织仅限于顶端圆锥区内长度不超过 的范围内,但是在实际操作中大多取得茎尖均会超过这个范围,不可能彻底去除病毒。美国研究苹果病毒始于本世纪 40年代初,到1982 年全国推广苹果无病毒裁培,英国于 4O年末期着手研究苹果病毒病害,到1982 年代末完成苹果无病毒化的普及工作[6]。吴国梁等(1990 )以“晋光”和“首红”的芽内生长点为材料,接种于 MS+ + mg/L 培养基中,