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水中细菌总数的测定和大肠菌群的检测（ 1）
录入时间:2010-9-2511:17:29 来源：生物信息网
（一)实验目的
了解和学习水中细菌总数和大肠菌群的测定原理和测情况的估计，选择2-3个适宜稀释度(饮用水如自来水、深井水等，一般选择
1、
1:10两种浓度；水源水如河水等，比较清洁的可选择
1:10、1:100、1:1000三种稀释度；污染水—被选择
1:100、1:1000、1:10000三种稀释度)，吸取1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作
3个重复。
③将熔化后保温度45℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平皿，每皿约15mL，并趁热转动平皿混合均
匀。
④待琼脂凝固后，将平皿倒置于 37℃培养箱内培养 24±1h后取出，计算平皿内菌落数目，乘以稀
释倍数，即得 1mL水样中所含的细菌菌落总数。
计算方法：
作平板计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出
同稀释度的各平板平均菌落数。
计数的报告：①平板菌落数的选择：
选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个重复时，应选取两
个平板的平均数。如果一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板计数
作为该稀释度的菌数。若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，可计算半个平板后
乘2以代表整个平板的菌落数。
②稀释度的选择：

30-300之间的稀释度，乘以该稀释倍数报告之
(表1例1)。
b．若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30-300之间，则视二者之比如何来决定。若其比值小于
2，应
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报告其平均数；若比值大于
2，则报告其中较小的数字(l例2、例3)。
c．若所有稀释度的平均菌落均大于
300，则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之
(l例4)。
d．若所有稀释度的平均菌落数均小于
30、则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之
(1例5)。
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e. 若所有稀释度均无菌落生长，则以小于 1乘以最低稀释倍数报告之（表 1例6)。
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若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，则以最接近30或300的平均菌落数乘以该稀释倍数报告之(表l例7)。
③细菌总数的报告：
细菌的菌落数在l00以内时，按其实有数报告；大于100时，用二位有效数字，在二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法修约。为了缩短数字后面的0的个数，可用10的指数来表示，如表1“报告方式”一栏所示。
大肠菌群的测定(多管发酵法)：
表1稀释度的选择及细菌数报告方式
稀释度及菌落数
两稀释度之
菌落总数/（cfu/g
或报告方式（菌落总数）/
10-1
10-2
10-3
比
cfu/mL）
（cfu/mL或cfu/g）
16000
1
多不可计
164
20
-
16400
或
×104
38000
2
多不可计
295
46
37750
或
×104
27000
3
多不可计
271
60
27100
或
×104
310000
4
多不可计
多不可计
313
-
313000
或
×105
5
27
11
5
-
270
270或
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0
0
0
-
＜10
＜10
7
多不可计
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水中细菌总数的测定和大肠菌群的检测（ 2）
录入时间:2010-9-2511:22:11 来源：生物信息网
生活饮用水或食品生产用水的检验：
①初步发酵试验：
在2个各装有50mL的3倍浓缩乳糖胆盐蛋白胨培养液 (可称为三倍乳糖胆盐 )的三角瓶中(内有倒置
杜氏小管)，以无菌操作各加水样 100mL。在10支装有5mL的三倍乳糖胆盐的发酵试管中 (内有倒置小管)，
以无菌操作各加入水样