组织制片技术
病理组织切片技术
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病理组织制片技术 定义
要实现对病变组织显微镜形态学检验,需要将取得病变组织制片。我们将切片制作所采取一
标本过薄
标本扭曲变形,过脆过硬 固定液浓度过高,过程过强
固定时间长
标本之间重合或与容器壁、底部紧贴
标本局部固定不良 标本过多,容器太少
标本轻,漂浮于固定液面
标本过大,过厚
标本中心固定不透 固定液渗透力强,浓度高使组织表层快速硬化
固定时间短
固定液失效
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固定不充分 固定充分
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三、洗涤、脱水、透明
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洗涤 定义
用水或乙醇等组织经过固定处理后,
未与组织结合固定液及沉淀物清洗掉
过程。
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洗涤 目标
去掉未与组织结合固定液及沉淀物
防止组织中留有较多固定液而妨碍脱水
组织中生成沉淀物或结晶而影响染色和观察
可降低甲醛色素
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洗涤方法
含水固定液洗涤方法(惯用是甲醛,用自来水冲洗即可)
含乙醇固定液洗涤方法(用乙醇或乙醇混合液固定组织,普通不需要清洗)
特殊固定液洗涤方法(使用固定液不一样,洗涤方法也不一样)
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脱水 定义
标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多水分,必须将组织块内水分置换出来,这一过程。
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不论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,惯用脱水剂为一系列不一样浓度乙醇。
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及时进行查对
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脱水 目标
组织块经巩固定和水洗后,含有大量水分,而水与苯、二甲苯等透明剂不混溶,故在组织前必须用能与透明剂相混合脱水剂(如乙醇等),把组织内水分置出来,为下一步做准备。
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惯用脱水剂
乙醇(最惯用脱水剂)
℃,脱水能力强,能硬化组织,可很好地与二甲苯混合。
脱水步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。
柔嫩组织脱水应从50%或30%乙醇开始
组织在高浓度乙醇(无水乙醇)中留置时间不宜过长。
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丙酮
沸点56℃,可用于染色前后脱水,对组织脱水作用,收缩作用均比乙醇强,价格较高,普通极少单纯使用。
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丙酮也是一个脱水能力很强脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有猛烈收缩作用,在制作科研、教学切片时普通不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡溶剂替换过程称为透明。惯用透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等
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异丙醇
是乙醇良好代用具,不含水,可代替无水乙醇。
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脱水方法
自低到高溶度依次进行,使组织中所含水分逐步降低直至被脱水剂代替。
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脱水机
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透明 定义
用一些化学试剂将组织中脱水剂置换出来,以利于浸蜡和包埋,因组织块浸入这此试剂后常呈半透明状
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透明 目标
透明是制片过程中很主要步骤。大多数脱水剂不能和包埋剂(如石蜡)混溶,而透明剂即可与脱水剂混溶,又能和
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